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血液学检验医学宣教本章主要内容:造血检验的基本方法◼血象和骨髓像检验骨髓检查的步骤与方法有核细胞增生程度、分级标准及粒红比例◼细胞化学染色检验常用的细胞化学染色及临床应用(POX、NAE、NAP、Fe、PAS)◼骨髓组织病理学检验◼血细胞的超微结构检验◼造血检验的临床应用◼其他自学2血液
学检验医学宣教三、骨髓象检验普通显微镜检查诊断:主要是血液疾病内容:常规检验特殊检验3血液学检验医学宣教三、骨髓象检验㈠临床应用1.适应症血细胞减少或增多。各种急慢性白血病。各种类型的贫血。4血液学检验医学宣教不明原因的骨
痛、骨质破坏、肾功能异常、黄疸、紫癜;不明原因的长期发热,肝、脾、淋巴结肿大;出血;恶性血液病化疗的疗效观察;5血液学检验医学宣教禁忌症:◼血友病、晚期妊娠6血液学检验医学宣教主要作用:辅助诊断(肯定性、支持性、可疑性、排除性诊断
)疗效的观察(完全缓解、部分缓解、未缓解)7血液学检验医学宣教(二)骨髓穿刺穿刺部位◼髂后上棘:第五腰椎向上3cm处。◼髂前上棘:顶端后约1-2cm处。◼胸骨:胸骨中线,相当第二肋间水平的胸骨体上端。◼小于3岁的小儿选择胫骨内侧8血
液学检验医学宣教标本的采集骨髓取材的部位和方法部位:胸骨、棘突、髂骨等处方法:多用穿刺法吸取9血液学检验医学宣教骨髓取材情况的判断⑴取材满意:①抽吸骨髓时病人有特殊的痛感;②骨髓液和涂片均有骨髓小粒和脂肪滴;③显微镜观察涂片骨髓特有细胞如:巨核细胞、浆细胞、
组织嗜碱细胞、成骨细胞、破骨细胞、网状细胞、网状纤维等。10血液学检验医学宣教④细胞比值骨髓中性粒细胞杆状核与分叶核>外周血中性粒细胞杆状核与分叶核骨髓有核细胞>外周血有核细胞11血液学检验医学宣教二、骨髓细胞学检查的内容与方法一、骨髓涂片
检查低倍镜检查油镜检查检查结果的临床意义血涂片的观察填写检查报告单12血液学检验医学宣教1、低倍镜检查:(1)观察骨髓涂片:取材:骨髓小粒、脂肪小滴制片:厚薄,头、体、尾分布染色:细胞着色情况13血液学检验医学宣教取材、制
片、染色14血液学检验医学宣教2.判断骨髓增生程度骨髓细胞增生分级(五级)增生极度活跃增生明显活跃增生活跃增生减低增生明显减低15血液学检验医学宣教骨髓增生程度分级(高倍镜)极度减低1~5/HP增生减低5~20/HP增生活跃20~50/HP明显活跃50~100/HP极
度活跃>100/HP16血液学检验医学宣教(二)、油镜检查:(1)有核细胞分类计数:计数200-500个有核细胞,计算各系统各阶段细胞百分率。(巨核细胞单独计数)(2)计数粒红比例(G∶E)(3)观察细胞形态有无异常(4)
观察有无其他特殊细胞及寄生虫。17血液学检验医学宣教二、血象检验:1.低倍镜检查:(1)涂片、染色情况;(2)有无大的异常细胞;(3)寄生虫;18血液学检验医学宣教2.油镜检查:(1)分类计数100个WBC(注意形态及有无异常细胞);(2)注意成熟红细胞
的形态(如有幼稚红细胞应在计数100个WBC中记录幼稚红细胞的数目及其阶段);(3)粗略估计血小板数目或形态;(4)有无寄生虫。19血液学检验医学宣教血片检查的重要性1.不同疾病时,骨髓象相似而血象有区别2.不同疾病时,骨髓象有区别而血象相似
(传淋和慢淋)3.同一患者骨髓象变化不显著,血象有异常(传单)4.同一患者骨髓象异常,血象无变化(MM)5.骨髓象难辨认,血象易辨认20血液学检验医学宣教细胞化学结果报告细胞化学结果(专门讲述)21血液学检验医学宣教填写骨
髓报告或打印骨髓报告保存好骨髓与血液片22血液学检验医学宣教诊断意见综合骨髓象、血象和细胞化学所见意见:肯定性诊断-----各种白血病、巨幼细胞性贫血、MM、骨髓转移癌、戈谢病、尼曼-匹克病等支持性诊断-----缺铁性贫血、再障、溶贫等可建议作相应检查23血液学检验医学宣
教可疑性诊断--难治性贫血等排除性诊断--ITP、类白血病形态学描写--骨髓象有改变,但提不出诊断性意见,建议动态观察对比意见---几次骨穿结果对比诊断意见24血液学检验医学宣教骨髓象检查的注意事项正确认识细胞是骨髓象检查的前提,检查者必须反复实践,积累经验,需
经较长时间的锻炼才能熟练掌握。不要根据一两个特点就做出肯定或否定的判断。宁可看得仔细而少看,不可贪多而马虎25血液学检验医学宣教正常骨髓象报告:1)增生活跃2)粒红比值正常(G∶E2~4:1)3)粒系增
生良好:a.占有核细胞的40~60%;b.各阶段细胞比例适当;c.细胞形态无明显异常。26血液学检验医学宣教粒细胞各阶段比例:原粒<2%,早幼粒<5%,中性中幼粒约8%,嗜酸中幼粒约<1%;中性晚幼粒约10%,嗜酸晚幼粒<2%杆状核约20%,嗜酸杆状核<3%,中性分叶核约12%,
嗜酸分叶核<5%,嗜碱性中幼粒、晚幼粒细胞罕见,杆状核、分叶核<1%27血液学检验医学宣教4)红系增生良好:a.占有核细胞的20-25%左右b.各阶段比例适当;原红细胞<1%,早幼红细胞<5%,以中、晚幼红细胞为主,各占10%;c.形态无明显异常或红细胞形态大致正常。28血液学检验医学宣教5)淋巴
细胞系统占20-25%;(主要是成熟细胞)6)单核细胞系统<4%(主要是成熟细胞)7)浆细胞系统<2%(主要是成熟细胞)29血液学检验医学宣教7)巨核细胞a.数量/全片:7-35个;(1.5cm×3.0cm)b.各
阶段情况正常;原巨核细胞不见或偶见,幼巨核细胞0-5%,颗粒巨核细胞10-27%,产血小板巨核细胞44-60%,裸核8-30%,血小板易见、成堆状存在,形态正常。30血液学检验医学宣教8)其他细胞:组织细胞、内皮细胞、
肥大细胞、网状细胞及组织嗜碱细胞等欧间,未见异常。9)无特殊细胞及寄生虫。31血液学检验医学宣教四、骨髓象分析有核细胞增生程度极度活跃:反映骨髓造血功能亢进(白血病)明显活跃:反映骨髓造血功能旺盛(贫血)增生活跃:反映骨髓造血功能基
本正常(正常骨髓象)增生低下:反映骨髓造血功能减低(AA)增生重度低下:反映骨髓造血功能衰竭(重型AA)。32血液学检验医学宣教血细胞数量改变1、粒/红比值⑴粒/红比值增加:>5:1,CML,感染⑵粒/红比值正常:2-4:1,两系成比例增
加或减少⑶粒/红比值减少:<2:1,粒系减少,红系增加,增生贫血33血液学检验医学宣教粒细胞数量改变1)粒系细胞增多原粒增多:M1、M2a、M4、CML(急变)早幼粒增多:M3,粒细胞缺乏,感染中幼粒增多:M2b,,CML,类白晚幼粒,杆状核为主
:CML、感染等。34血液学检验医学宣教嗜酸粒细胞增多:变态反应,寄生虫,嗜酸粒细胞白血病,CML;嗜碱粒细胞增多:嗜碱粒细胞白血病,CML等粒细胞减少粒细胞缺乏症、AA、急性造血停滞等35血液学检验医学宣教红系细胞数量改变红
系细胞增多原红及早幼红增多:红血病,M6中红及晚幼红增多:增生性贫血(溶贫,缺铁贫等)巨幼红/巨幼样变增多:巨幼贫、红白血病、MDS等铁粒幼红细胞增多:铁粒幼红细胞贫血、MDS36血液学检验医学宣教巨核细胞数量改变巨核细胞增多增殖性疾病、M7、
ITP、脾亢巨核细胞减少AA、AML37血液学检验医学宣教淋巴系细胞数量改变原幼淋增多:ALL、慢粒急变、淋巴瘤白血病等;成熟淋巴细胞增多:CLL、淋巴瘤白血病、再障、淋巴细胞性类白血病、传淋、传单等38血液学检验医学宣教单核细胞改变原、幼单核细胞为主
:急单,慢单急变、粒-单白血病等成熟单核细胞为主:慢单、慢性粒--单细胞白血病、CML39血液学检验医学宣教其他细胞改变浆细胞增多:恶性增多:浆白,MM等良性增多:AA,感染等组织细胞增多:恶性增多:恶组,MM良性
增多:感染性疾病40血液学检验医学宣教(三)、血细胞形态的改变1.胞体异常大小异常:巨变,幼红,小原粒形态异常:不规则,多形性,伪足状突起成熟红细胞椭圆形,口形,球形,泪滴形,靶形。41血液学检验医学宣教成熟红细胞的形态异常42血液学检验医学宣教2.胞核异常数目
:双核和多核形态异常:不规则形,凹陷,切迹,折叠,扭曲。核染色质核仁异常异常核分裂43血液学检验医学宣教3.胞质量异常:增多或减少内容物异常:Auer,中毒性颗粒,空泡变化着色异常:多嗜性红细胞颗粒异常:增多或减少内外质异常:发育不平衡44血液学检验医学宣教本节小结骨髓细胞的形态学特征;骨
髓细胞学检查的步骤与方法;骨髓细胞的增生程度、粒红比值;正常骨髓的特征;45血液学检验医学宣教第二节、血细胞的细胞化学染色定义:血细胞化学染色是以形态学为基础,根据化学反应原理,将骨髓片染色,观察单个细胞内在的生化
特性,了解它们的代谢活动,生理功能和病理变化.鉴别各种类型血液细胞46血液学检验医学宣教(一)过氧化物酶染色(Peroxidase,POX))[原理]H2O2细胞内POX[O]↑联苯胺[O]联苯胺蓝+亚硝基氰化钠暗蓝色颗粒(定位于胞浆内)[结果]粒系:强阳性单核系:弱阳性淋巴系:
阴性[临床意义]鉴别急粒和急淋47血液学检验医学宣教(二)苏丹黑B染色(Sudanblack,SB)[原理]苏丹黑B(脂溶性染料)细胞质内含脂结构棕黑色或深黑色[结果]粒细胞系统:阳性(黑色粗大)单核细胞系统:阳性(黑色细小)其他细胞:
阴性48血液学检验医学宣教[临床意义]大致同POX;可用陈旧骨髓片49血液学检验医学宣教(三)中性粒细胞碱性磷酸酶染色(neutrophilalkalinephosphataseNAP)(偶氮偶联法)[原理]磷酸萘酚钠NAP萘酚+重氮盐偶联PH9.6(亮红色沉着于胞浆中)[结果]
NAP主要存在于成熟中性粒细胞,其他血细胞均呈阴性反应。50血液学检验医学宣教中性粒细胞碱性磷酸酶染色(neutrophilalkalinephosphataseNAP)(钙钴法)[原理]β-甘油磷酸钠NAP甘油+磷
酸钠NaHPO4+Ca(NO3)2+(NH4)SCO↓棕黑色(沉着于胞浆中[结果]NAP主要存在于成熟中性粒细胞,其他血细胞均呈阴性反应。51血液学检验医学宣教1、胞浆中出现灰色到棕黑色沉淀者为阳性。2、反应强度分为五级:-++++++++++淡红
淡灰灰黑浅棕黑深棕黑色3、百分率:计数100个成熟中性粒细胞,计算阳性率。4、积分法:计数100个成熟粒细胞,按反应强度作出分级,将其百分率乘以级数,然后相加。52血液学检验医学宣教53血液学检验医学宣教54血液学检验医学宣教类白血病反应慢粒白血病反应55血液学检验医学宣教[
参考值]正常:百分率10-40%,积分40-80分[临床意义]1.区别CML、类白血病反应↓积分为0;↑积分>200分2.急粒积分↓;急淋积分↑;急单N或↓3.AA时↑PNH↓4.化脓性感染↑病毒性感染
时↓56血液学检验医学宣教慢性粒细胞性白血病Chronicmyeloidleukemia57血液学检验医学宣教慢粒阴性58血液学检验医学宣教(四)、酸性磷酸酶(acidphoshataseACP)原理:硫化铅和偶带偶联法结果:胞质内出现棕黑色颗粒者为阳性(硫化铅)胞质内出现亮红色颗粒者为阳性(偶
氮偶联法)59血液学检验医学宣教◼临床意义鉴别多毛细胞白血病,不被L-酒石酸所抑制60血液学检验医学宣教鉴别T细胞白血病与B细胞白血病阳性阴性鉴别Gaucher病与Nienann-Pick病阳性阴性61血液学检验医学宣教(五)、氯醋酸AS-D萘酯酶染色naphytholAS-D
chloroacetateesterase,AS-DNCE原理:氯醋酸AS-D萘酚AS-DNCEAS-D萘酚H2O不溶性红色沉淀+坚牢酱紫62血液学检验医学宣教结果63血液学检验医学宣教临床评价急性白血病的鉴别
:1.急性粒白血病M31+~2+2+~3+2.急性单核细胞白血病原、幼单核细胞---阴性3.急性淋巴细胞白血病原、幼淋细胞----阴性64血液学检验医学宣教(六)α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)(α-naphythyolacetateesterase)α-醋酸萘酚α–NAEα-萘
酚+重氮盐(坚牢蓝B)棕黑或灰黑色(胞桨中)65血液学检验医学宣教临床评价鉴别白血病类型;同时必须做NaF抑制试验急性粒细胞白血病---原粒细胞弱阳性,不被NaF抑制;急性单核细胞白血病---原单核细胞阳性,被NaF抑制;66血液学检验医学宣教结果判断阳性:胞桨
中出现棕黑、灰黑色颗粒沉淀67血液学检验医学宣教急性单核细胞白血病acutemonocyticleukemia68血液学检验医学宣教非特异性酯酶+NaF69血液学检验医学宣教(七)糖原染色(过碘酸-雪夫反应)(periodicacid–Schiff,PAS)【原理】过碘酸细胞内的糖原氧化双醛基
+无色品红(雪夫碱)紫红色沉淀70血液学检验医学宣教结果判断阳性:胞质中红色颗粒或弥漫状物质71血液学检验医学宣教淋巴细胞判断0无色1+一圈PAS颗粒2+两圈PAS颗粒3+三圈PAS颗粒4+红色大团块72血液学检验医学宣教(八)、铁染色原理:4
Fe3++3K4「Fe(CN)6」含铁物质亚铁氰化钾Fe4「Fe(CN)6」3+12K+亚铁氰化铁74血液学检验医学宣教结果判断细胞外铁:存在于骨髓小粒的巨噬细胞中的蓝色颗粒细胞内铁:存在于有核红和成熟红细胞内的铁;75血液学检验医学宣教细胞外铁76
血液学检验医学宣教第三节、骨髓活检观察结构和空间定位77血液学检验医学宣教骨髓活检的适应症◼骨髓穿刺失败◼全血细胞减少◼白血病疗效观察78血液学检验医学宣教临床评价血液病诊断金标准:骨髓活检与穿刺涂片联合检测79血液学检验医学宣教血细胞
超微结构检验定义:在电子显微镜下结合各种超微结构技术,如酶细胞化学、放射自显影和X光衍射等,所观察到的血细胞微细结构。80血液学检验医学宣教第六节血细胞染色体技术在血液病领域广泛应用(1960年Ph小体)81血液学检验医学宣教染色体命名法:臂
—以着丝粒将每一染色体分为长臂(q)和短臂(p)。区—两相邻界标之间的区域,从着丝粒往远侧依序编号。带—从着丝粒往远侧依序编号,作为界标的带属于此界以远的区。着丝粒长臂短臂姐妹染色单体82血液学检验医学宣教1.在白血病中50-80%的髓细胞白血病人染色体异常2
.白血病人预后判断、指导治疗AML中t(15;17)inv(16),t8;21)预后良好3.鉴别白血病微量残留病灶FISH技术83血液学检验医学宣教能影响到的染色体12345678910111213141516171819202122XY表现形
式tdelderdupinsinv易位缺失衍生重复插入倒转84血液学检验医学宣教第五章、造血检验的临床应用第一节血液病中诊断中的应用一般造血检验-----光学显微镜特殊造血检验------细胞生物技术造血
干细胞的培养85血液学检验医学宣教血液病诊断中的应用干细胞疾病其他血液疾病血液病治疗检测中的应用造血干细胞移植的监测常规化疗的监测86血液学检验医学宣教本章小结[掌握]◼1.正常骨髓细胞的形态学特征和正常骨髓象特征。◼2.常用的细胞化学染色及临床应用(POX、NA
E、NAP、Fe、PAS)◼3.骨髓检查的步骤与方法◼4.有核细胞增生程度、分极标准及粒红比例87血液学检验医学宣教复习题◼骨髓细胞形态学检查的适应症是什么?◼骨髓细胞学检查的主要内容是什么?◼骨髓增生程度的分级、标准及临床意义?◼正常
人的骨髓特点是什么?◼常用的细胞化学染色有哪些?它们的临床意义是什么?88血液学检验医学宣教