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12形态特征3肉毒梭菌一、肉毒梭菌的生物学特性1、形态与染色肉毒梭菌属于厌氧性梭状芽胞杆菌属，革兰氏染色阳性(老龄菌是阴性），约为4×1μm的大杆菌，多单在，偶见成双或短链，两侧平行，两端钝园，直杆状或稍弯

曲，芽胞为卵圆形，大于菌体宽度，位于次极端，使菌体呈匙形或网球拍状，偶有位于中央，常见很多游离芽胞。有4~8根周生鞭毛，运动迟缓，无荚膜。4病毒因子52、培养特性➢最严格的厌氧菌➢生长最适温度：28℃～37℃：pH为6.8~7.6，产毒的最适pH为7.8~8.2。➢产毒培养温度：

不同菌型产毒的最适培养温度不完全相同。C、D型温度高些为宜，35℃培养3d即可，而E型菌低温度长时间培养效果较好。➢对营养要求不高：在普通培养基上都能生长。肉毒梭状芽孢杆菌菌落在固体培养基表面上，形成类圆形，边缘不整齐，约3毫米

左右的菌落。菌落半透明，表面一般比较光滑也有的呈颗粒状，界线不明显，向外扩散。呈绒毛网状，常常扩散成菌苔。62、培养特性➢在含有肉渣的液体或者半流动培养基中，肉毒梭菌生长旺盛且产生大量气体，A、B、F三型表面浑浊，底部有粉状和颗粒状沉淀

，并能消化肉块，变黑有臭味；而C、D、E三型表明清亮，絮片状生长，粘贴于管壁。肉毒梭状芽孢杆菌菌落在葡萄糖鲜血琼脂平板上，菌落较小，扁平，颗粒状。中央低落，边缘不规则，有的菌落还有大的溶血环。在卵黄琼脂平板上生长，菌落及其培养基周围表面覆盖着特有的彩虹样薄层，但G型

没有。73、抵抗力•本菌芽胞抵抗力强，在湿热100℃可生存5小时;干热180℃2小时、高压蒸汽121℃30分钟才能将本菌芽胞杀死。肉毒毒素不耐热，100℃20分钟即可破坏。8二、肉毒梭菌的致病性肉毒梭菌能产生外毒素即肉毒毒素（大分子蛋白），根据毒素的抗原特异性将其分为A、B、C（1、2）、D

、E、F、G七个型别。与毒素型别相对应，肉毒梭菌也分为同样的七个型别。其中A、B、E、F四型毒素对人有不同程度的致病性。A型毒素经60℃2分钟加热，差不多能被完全破坏，而B、E二型毒素要经70℃2分钟才能被破坏；C、D二型毒素对热的抵抗更大些；C型毒素要经过90℃2分钟

加热才能完全破坏，不论如何，只要煮沸1分钟或75℃加热5~10分钟，毒素都能被完全破坏。肉毒毒素对酸性反应比较稳定，对碱性反应比较敏感。某些型的肉毒毒素在适宜条件下，毒性能被胰酶激活和加强。9致病物质➢主要依靠神经外毒素。其作用机制：肉毒杆菌毒素作用于胆碱能运动神经末梢，以某种方式拮抗钙

离子的作用，干扰乙酰胆碱从运动神经末梢的释放，使肌纤维不能收缩。肉毒杆菌毒素不阻断神经兴奋的传播，神经和肌肉都没有兴奋性和传导性的损害。这种作用也称为化学去神经作用。10致病机理肉毒毒素是一种神经麻痹毒素，主要抑制神经末梢释放乙酰胆碱，引起肌肉松弛

麻痹，特别是呼吸肌麻痹导致死亡。􀂙肉毒毒素的毒性极强，是目前已知在天然毒素和合成毒剂中毒性最强的生物毒素，据称，精制毒素1克能杀死400万吨小白鼠，一个人的致死量大概1微克左右。肉毒中毒一年四季均可发生。美国以罐头发生

中毒较多，日本以水产品较多；我国以发酵食品（如：臭豆腐、豆瓣酱、豆豉等）发生中毒较多。11所致疾病•成人肉毒中毒•该病是单纯性毒素中毒，而非细菌感染引起。多见于食入肉毒毒素食品后，数小时或数十小时可出现以神经末梢麻痹为主的症状，患者出

现斜视、复视、眼睑下垂，严重的出现吞咽、咀嚼困难、口齿不清，进而因膈肌麻痹而死亡。患者神志清醒，不发热，很少有胃肠道症状。12•婴儿肉毒中毒•多见于2周~8个月的婴儿。由于婴儿肠道的特殊环境及缺乏拮抗肉毒梭菌的

正常菌群，又食入被梭菌污染的食品，该菌在肠道内生长繁殖并产生毒素，毒素被吸收而致命。最早出现的症状是便秘，吸乳、啼哭无力，其他症状与成人肉毒中毒类似。13三微生物学检验•1、取.粪便检查在显微镜检查可见革兰阳性芽胞杆菌。•2.细菌培养：将可疑食物、呕吐物或排泄物加热

煮沸20分钟后，接种于血琼脂培养基作厌氧培养，可分离出肉毒梭菌。•3.毒素试验•（1）动物试验将检查标本浸出液饲喂动物，或作豚鼠、小白鼠腹腔内注射。可引起动物四肢瘫痪而迅速死亡。婴儿型者则可用婴儿粪便浸出液作动物试验。•（2）中和试验将各型抗毒素血清0.5ml注射小白鼠腹

腔内，随后接种标本0.5ml同时设对照组，从而判断毒素和定型。•（3）禽眼睑接种试验将含有毒素的浸出液0.1～0.3ml，注入家禽眼内角下方眼睑皮下，出现眼睑闭合、或出现麻痹性瘫痪和呼吸困难，经数十分钟至数小时死亡

，可作为快速诊断。•4.毒素检测•应用抗肉毒毒素抗体进行中和试验，检查病人血清中肉毒毒素，可对毒素分型。•5．肌电图检查：有肌纤维颤动、单次刺激反应降低，多次刺激电势反而增高，有短持续期小波幅多相运动、电势增加等表现。可

作为辅助诊断。14四防治原则•预防本病的主要方法：•1、加强食品卫生管理和监督•2、对可疑食品可煮沸半小时以上，破坏肉毒毒素。•3、对患者早期注射足量的多价肉毒抗毒素，同时加强护理和对症治疗，尤其是维持呼吸功能，降低死亡率。15临

床应用•在了解了毒素的结构与功能以及作用机制后，人类开始用毒素来作为有效药物。肉毒毒素被助恶治疗眼睑痉挛、痉挛性斜颈、痉挛性发音困难等疾病•美容•除皱16去除动态皱纹的原理将收缩造成皱纹的肌肉麻痹掉，使肌肉不收缩，连带

的也去除了皱纹。一般在注射后三、四天就可以看到效果，一周后效果就很明显。效用期约三至六个月，平均四个月。若皱纹再出现，视个人需要，可重复施打。肉毒杆菌毒素除皱还是有一定的并发症和副作用，如注射局部有头痛；抬头纹处注射不当时会发生睑下垂；鱼尾纹处注射不当时会发生复视及

闭眼不全；因注射剂量不准确，一侧多、一侧少会发生不对称的结果；进针刺破血管偶而发生出血或血肿；大剂量、反复注射可能会引起免疫复合物疾病；肌肉麻痹的结果是不能做各种表情1718副作用➢尽管如此，肉毒杆菌毒素除皱还是有一定的并发症和副作用，如注射局部有头痛；抬头纹处

注射不当时会发生睑下垂；鱼尾纹处注射不当时会发生复视及闭眼不全；因注射剂量不准确，一侧多、一侧少会发生不对称的结果；进针刺破血管偶而发生出血或血肿；大剂量、反复注射可能会引起免疫复合物疾病；肌肉麻痹的结果是不能做各种表情，有假面具样感觉；极少数病人可发生过敏性休克。1920