【文档说明】酰胺药相关的耐药性革兰阳性球课件.ppt，共(56)页，268.001 KB，由小橙橙上传

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2023/3/221与－内酰胺药相关的耐药性◼革兰阳性球菌影响◆MRSA，MRSCoNPBP所有B-内酰胺◆MREPBP◆PRSPPBP◼流感嗜血杆菌青霉素酶◼卡它莫拉菌青霉素酶(PRO-1,2)◼肠杆菌科的耐药性◆肺炎克雷伯菌

,大肠杆菌ESBLs3,4代头孢…◆肠杆菌，枸橼酸杆菌BushI型酶3代头孢…….◼非发酵糖的革兰阴性杆菌◆嗜麦芽窄食单孢菌通透性，酶◆绿脓杆菌通透性，酶◆不动杆菌酶，通透性2023/3/222肠杆菌科的耐药性主要

菌主要酶类次主要酶◆肺炎克雷伯菌,大肠杆菌ESBLsBushI型酶◆肠杆菌，枸橼酸杆菌BushI型酶ESBLs2023/3/223现状◼TEM3-90(IRT16种)71种◼SHV2-31(IRS1种)28种◼OXA10-3121种◼CTX-M1-17◼PER:2◼IEB:2◼GES:1◼B

ES:1◼SPO:1◼OXY:22023/3/224B-内酰胺酶的演变特征TEM1TEM2TEM3Gly39Ser238Lys39Gly238Gly104lys1042023/3/225每一点变化可能改变底物的亲和

力噻肟他啶安曲南◼TEM-10.1250.250.125◼TEM-3326416◼TEM-70.5642◼CTX-M11642322023/3/226SHV-2TEM-3PSESMENMEKOXYCTX-M-1

TOHO-1CITD-1YENTBLIPCAKCCROB-1PC-1PER-1PER-2CBPACBLAVEB-1CPXA中国，台湾日本泰2023/3/227现状◼TEM3-90(IRT16种)71种◼SHV2-

31(IRS1种)28种◼OXA10-3121种◼CTX-M1-17◼PER:2◼IEB:2◼GES:1◼BES:1◼SPO:1◼OXY:22023/3/228SHV-8SHV-1SHV-10SHV-11SHV-2aSHV-12SHV-2

SHV-5SHV-?SHV-9SHV-7SHV-?SHV-4SHV-3SHV-61791793513054or140353524024020520524054or1408or438or43238238SHV突变相关图JHeritageJAC，1999，44，30

9－3182023/3/229酶族的地理分布，，，－B-酶首例年有报告的国家pISHV-1瑞士19747.6SHV-2德国1983中国,丹麦,法国,西班牙,南非7.6瑞士,英国SHV-2a德国1986朝鲜,瑞士7.6SHV3法国1986英国,

美国7.0SHV4法国1987比利时,葡萄牙,英国,美国7.8SHV5智利1987澳洲,奥地利,丹麦,埃及,法国,希腊8.2意大利,波兰,南非,台湾,英国,美国SHV6法国19917.6SHV7美国1

9937.6SHV8美国19907.6SHV9,10希腊1996,978.2SHV11瑞士19977.6SHV12瑞士1997阿尔几利亚，朝鲜8.2SHV28中国浙江20002023/3/2210现状◼TEM3-90(IRT16种)71种◼SHV2-31(IRS1种)28种◼OX

A10-3121种◼CTX-M1-17◼PER:2◼IEB:2◼GES:1◼BES:1◼SPO:1◼OXY:22023/3/2211－族亚组1亚组2亚组3亚组4CTX-M-1CTX-M-2CTX-M-9CTX-M-8MEN-1TOHO-1CTX-M-13CTX-

M-3CTX-M-4CTX-M-14CTX-M-10CTX-M-5CTX-M-15CTX-M-11CTX-M-6CTX-M-72023/3/2212CTX-M系列的发现历史(美国基因库资料)◼发现年,地址,发现菌pI参考文献◼C

TX-M-11990,德国,E.coli8.911◼Men-11992,意大利,K.oxytoca8.99◼CTX-M-21992,阿根廷,S.typhimurium7.910◼Toho-11995,日本E.coli7.813◼

CTX-M-31998,波兰华沙C.reundii8.48◼CTX-M-41998,俄罗斯S.typhimurium8.412◼CTX-M-51998,拉特维亚S.typhimurium8.816◼CTX-M-61998,西腊S.typhimur

ium8.417◼CTX-M-71998,西腊S.typhimurium8.417◼Toho-21998,日本E.coli7.714◼CTX-M-82000,布鲁塞尔E.Cloacae7.618◼CTX-M-92000,西班牙E.coli8.03◼CTX-M-

112000,北京协和K.pneumoniae8.019◼CTX-M-13-152001,广州人民K.pneumoniae8.0202023/3/2213在东南亚◼1999TEM-52，SHV-2a,12ECOKL-南韩◼1997TEM-26CTX-M5ECOKL-日本SHV-2,12,24◼19

99SHV-2a,5,12VEB-1,ECO,KL-泰国◼2000T-10CTX-M-3ECO,KL-台湾SHV-2,5,12,25,26◼1992SHV-2，5，12，EN－,KL-,中国◼2000CTX-M-11，13,14,15KL-,ECO中国◼2000SHV-28中

国2023/3/2214不同细菌中的出现特点大肠杆菌肺克肠杆菌属枸橼酸杆菌111CTX-M-132CTX-M-13,TEM1B2CTX-M-14,TEM1B111CTX-M-14,SHV122CTX-M-15,SHV11,TEM1B11SHV12,TEM1B2023/3/2215如何测出头孢噻肟

＋克拉维酸头孢他啶＋克拉维酸头孢噻肟阿莫西林＋克拉维酸头孢噻肟不同程度水解ESB体外可被棒酸抑制但IRT可抑制棒酸作用出现非TEM非SHV酶MIC＝8MIC＝12023/3/2216抗生素MIC（μg/ml）敏感性MIC50MIC90平均MICR%I%S%头孢他啶0.

250.50.36900100头孢噻肟0.250.250.30200100头孢曲松0.250.250.29800100头孢吡肟0.250.250.26300100氨曲南0.250.250.27800100头孢哌酮/舒巴坦

0.2510.33800100哌拉西林/他唑巴坦242.36094亚胺培南0.250.250.25300100头孢美唑0.520.87100100环丙沙星0.06220.1418092庆大霉素111209852株ESBL阴性肺炎克雷伯菌的耐药情况2

023/3/2217抗生素MIC（μg/ml）敏感性MIC50MIC90平均MICR%I%S%头孢他啶42564.914086头孢噻肟3212834.8393625头孢曲松12825662.268725头孢吡肟141.10793氨曲南166413.5363232头孢哌酮/舒巴坦8327.8778

6哌拉西林/他唑巴坦242.20496亚胺培南0.250.250.27900100头孢美唑11282.111089环丙沙星0.06640.41413186庆大霉素15123.7809228株ESBL阳性肺炎克雷伯菌的耐

药情况2023/3/221928株ESBL阳性Kpn中两种抗生素的MIC比较25612864321684210.50.311142233321121.3.51248163264128256头孢噻肟mg/L头孢他啶mg/LRR2023/3/2220

大肠杆菌＋肺炎克雷伯菌2812612411122111201111181111121116111121113114111212111221121411214112101121211111811121611131104941268101

2141618202224262830ceftazidime(mm)cefotaxime(mm)头孢他啶mm头孢噻肟2023/3/2221大肠杆菌＋肺炎克雷伯菌321302811126112411122112011811161114111121111110

111812211111611111313136171237105111ceftriaxone(mm)头孢曲松头孢他啶mm2023/3/2222头孢他啶头孢噻肟等电点pI值棒酸抑制结合子CK64648.8+结合子CK72645.4、7.6、8.8+结合子CK81168

.8+结合子CK101327.6、8.8+结合子CK122647.8、8.8+结合子CK152327.6、8.8+结合子CK160.5167.6、8.8+结合子CK181647.8、8.8+结合子CK212645.4、7.6、8.8+结合子CK232645.4、7.6、8.8+接合子的MIC值和

等电点的结果(1)2023/3/2223头孢他啶头孢噻肟等电点pI值棒酸抑制结合子CK241328.8+结合子CK251327.6、8.8+结合子CK262647.6、8.8+结合子CK44325.4、6.3+结合子CK141645.4、7.6、7.8+结合子CK221327.6、7.8+结合子C

K272645.4+结合子CK1340.255.4+结合子CK17320.255.4+结合子CK2010.255.4（条带很淡）+接合子的MIC值和等电点的结果(2)2023/3/2224及的等电点差别45678910012345等电点TEMSHVOXACTX-MAmpCESBLs2023/3/

2225A胶B胶等电聚焦鉴别质粒介导的ESBL和持续高产AmpC酶AmpC对照2023/3/2226一种新的对头孢噻肟高活性pI偏碱性的ESBL•到当时为止，CTX-M系列的ESBL有10个•根据基因序列，分为3组•组内同源性很高，97%以上•组间有80%的同源性已知的C

TX-M系列ESBL同源性1组1，3,10,1199%2组2，4，5,6,797%3组9,13,14,1597%4组82023/3/2227为克隆ESBL耐药基因所设计的引物引物名引物序列位置TEM5’5’-GTATCCGCTCATG

AGACAATAACCC-3’(-60至-36)TEM3’5’-GGCACCTATCTCAGCGATCTGTC-3’(818至840）SHV5’5’-GGGTTATTCTTATTTGTCGC-3’(-67至-48）SHV3’5’-TTAGCGTTGCCAGTGCTC-3’(844至

861）CTX51’5’-ATGGTTAAAAAATCACTGCGCC-3’(1至22）CTX52’5’-ATGATGACTCAGAGCATTCG-3’(1至20）CTX53’5’-CGGCCTGTATTTCGCTGTTG-3’(61至80）CTX

3’5’-TGGGTTACGATTTTCGCCGC-3’(853至872）CTX51’系1组的5’端通用引物CTX52’系2组的5’端通用引物CTX53’系3组的5’端通用引物2023/3/2228氨基酸的位点3980117122143278289CTX-M-1EVDLSDNCT

X-M-3EANLADDCTX-M-NGANPAHND*缩写：A=丙氨酸、D=天冬氨酸、E=谷氨酸、G=甘氨酸、H=组氨酸、L=亮氨酸、N=天冬酰胺、P=脯氨酸、S=丝氨酸V=缬氨酸CTX-M-N与C

TX-M-1、CTX-M-3突变点的比较2023/3/2229产的临床株的流行情况王辉工作细菌菌数ESBL(+)株发生率(%)◼E.coli44511.4◼K.pneumoniae431739.5◼E.cloacae5036.0◼C.freundii2528.0◼总计1622

716.72023/3/2230结合子和序列分析王辉工作◼结合子供体bpICTX-M3-PCRTEM-PCR序列分析a序列分析a◼2Teco5.4,8.8CTX-M3ND◼15Tkpn5.4,8.6CTX-M3ND◼25Tecl5.4,7.0,7.2,8.2,8

.8CTX-M3ND◼26Tcfr5.4,8.8CTX-M3ND◼1Teco5.4,7.6,8.3NDTEM-1b:eco=E.coli,kpn=K.pneumoniae,ecl=Enterobact

ercloacae,cfr=Citrobacterfreundiia:ND=Notdone2023/3/2231大肠杆菌为什么高度耐环丙沙星30株基因分析（王辉工作）旋转酶突变：•gyrA30/30至少2个突变点，•par

C30/30有一个突变点•gyrB6/6无突变点逆泵•marAsoxS无过量表达•AcrAB18/30(60%)有过量表达膜蛋白•OmpF30/30缺无，减少吸收2023/3/2232肠杆菌科的耐药性主要菌主要酶类次主要酶◆肺炎克雷伯菌,大肠杆菌ESBLsBushI型◆肠杆菌，枸橼酸杆

菌BushI型ESBLs2023/3/2233产气肠杆菌中的，，◼在抗生素选择性压力下，易产生稳定高产染色体1型酶◼近来证实本菌也可产生质粒型ESBLs◼从美国Virginia州某教学医院分离出31株产气肠杆菌，29株为SHV4，1株SHV3

，1株SHV5，◼这些质粒可转移至大肠杆菌这31株菌对头孢吡肟，亚胺培南均敏感◼细菌室也要查肠杆菌属中的ESBL，并报告药敏结果2023/3/2234许多阴沟、产气肠杆菌也产希腊阴沟肠杆菌中18/56

(25%)产气肠杆菌中7/12(58%)包含cazR,ctxR,croR,ptzR,4代头孢R不同株耐药谱不同2023/3/2235◼法国23家医院：123株产气肠杆菌◼21家有流行的克隆株：ESBLTEM-242023/3/2236台湾，年－月菌株◼1999年1－9

月，1210株大肠杆菌◼查18株产ESBLs、耐CAZ、CTX、FOX菌◼数目酶种类◼10CTX-M-3、TEM-1◼2SHV-12、TEM-1◼1SHV-5、TEM-1◼4未知、TEM-1◼1TEM-102023

/3/2237◼吴伟元在协和收集的阴沟肠杆菌中3株质粒上载有CTX-M-32023/3/2238讨论•产ESBL的耐药是目前抗生素面临的挑战之一•监测产ESBL菌株对临床治疗的重要性•一种新的CTX-M型ESBL2023/3/2239的发展现状◼当调节基因

发生突变，其作用受到抑制，对3代头孢产生高水平、持续的去遏制的耐药◼80年代前，都报道为染色体型◼80年代后，有质粒型的，增加了传播力◼AmpC种类也在不断增加。2023/3/2240协和医院查24株临床株阴沟肠杆菌中的SSBLs高产AmpC+-+54ESBL-1418株E.cloaca

e(阴性对照)均为阴性2023/3/2241吴伟元的工作◼6株阴沟肠杆菌◼持续高产染色体AmpC酶的原因是◆基因组中AmpD基因发生了突变◆有一株形成无意义密码子终止了蛋白质的形成2023/3/2242树年总结FO

X-1BIL-1LAT-1阴沟肠杆菌MIR-1粘质沙雷菌AmpCCMY-1MOX-1绿脓杆菌AmpCAmpC大肠杆菌AmpC枸橼酸杆菌AmpCCMY-2IIIIIICMY-1(朝)LAT1-4MIR-1(美)CMY8-11(台,中国)CMY2,4-,7ACT

-1(美)MOX-1(日本)BIL1ACT-12023/3/2243质粒的最新分类及流行IIIIIICMY-1(朝)LAT1-4MIR-1(美)CMY8-11(台,中国)CMY2,4-7ACT-1(美,中国)MOX-1

(日本)BIL12023/3/2244台湾，年－月菌株◼1999年1－9月，1210株大肠杆菌◼查18株产AmpC、耐CAZ、CTX、FOX菌◼数目酶种类◼9未知、TEM-1◼4CMY-2、TEM-1◼3未

知、TEM-1◼1未知、CMY-2、TEM-1◼1CMY-2、CTX-M-3、TEM-12023/3/2245美国：、在同一质粒上◼ESBL＋质粒AmpC=SSBL◼Super◼Spectrum◼Beta◼

Lactamases2023/3/2246鉴定有一定困难，常规难以进行分子水平的方法◼3ESBL+1AmpC一株菌◼美国某城市、38个实验室产加测试◼假阴性8个(21％)◼假阳性7个(18％)2023/3/

2247陈轶兰的工作:◼在大肠杆菌中的12号株,◼发现可转移的大质粒中含有ACT-1ESBL◼其意义是BushI型AMP-C基因也可存在与其他肠杆菌科菌中2023/3/2248树年总结FOX-1BIL-1LAT-1阴沟肠杆菌MIR-1粘质沙

雷菌AmpCCMY-1MOX-1绿脓杆菌AmpCAmpC大肠杆菌AmpC枸橼酸杆菌AmpCCMY-2IIIIIICMY-1(朝)LAT1-4MIR-1(美)CMY8-11(台,中国)CMY2,4-,7ACT-1(美)MOX-1(日本)BIL1

ACT-12023/3/2249产AmpC酶菌的等电点和药敏JCM2000,38:1793◼10株产AmpC酶菌◼等电点9.0-9.1◼对头孢吡肟MIC90：0.5mg/L◼对亚胺培南MIC90：0.13mg/L2023/3/2250头孢吡肟对组内酰胺酶稳

定.Km,对头孢菌素的亲和力[uM]细菌头孢吡肟头孢他啶头孢噻肟阴沟肠杆菌58-1803-170.05-0.2弗劳地枸橼酸杆菌属1590.9-1.2--绿脓杆菌87－9413－160.03Fung-Tomc,clinicalMicroi

ologyNewsletter1997;19:129-1362023/3/2251头孢西汀ESBL酶AmpC酶大肠杆菌ATCC25922质粒型AmpC检查新法Coudron,PE.JCM2000,38:179

12023/3/2252耐药率肠杆菌枸橼酸杆菌药名株株哌拉西林/他唑巴坦28.519头孢哌酮/舒巴坦17.316亚胺培南01.8头孢吡肟10.612头孢他啶29.832头孢噻肟34.131头孢曲松33.834阿米卡星4.810环丙沙星21.7332023/3/2253大肠杆菌耐药率－

＋药名株株哌拉西林/他唑巴坦1.36头孢哌酮/舒巴坦0.826亚胺培南00头孢他啶0.85头孢吡肟0.837头孢噻肟1.776头孢曲松1.790阿米卡星411环丙沙星60822023/3/2254肺炎克雷伯菌耐药率－＋药名株株哌拉西林/他唑巴坦726头孢哌酮/舒巴坦229亚胺培南00头

孢他啶414头孢吡肟136头孢噻肟566头孢曲松579阿米卡星217环丙沙星18382023/3/2255抗生素的发展动态◼氟喹诺酮类:◆3代,4代新药加强了对肺炎球菌,革兰阳性球菌的活性◆但最好的:clinafloxacin,trovaflox

acin,grepafloxacin由于毒性已退出临床◆对绿脓杆菌和其他革兰阴性杆菌无一新药超过环丙沙星药物泵出机制,2023/3/2256抗生素的发展动态◼头孢菌素类:◆3代,4代头孢菌素对革兰阴性菌很强活力◆近年来,新的头孢菌素都只加强革兰阳性菌的活力◆卡巴培南类,BO-2727--

-绿脓杆菌,革兰阴性菌Ertapenem---长半衰期,一天一针,==头孢曲松2023/3/2257抗生素的发展动态◼企图发现,比较成功的:◆针对AMP-C酶的抑制剂,◆氟喹诺酮类泵出机制抑制剂(绿脓杆菌)◆四环素泵出机制抑制剂