【文档说明】兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等课件.pptx,共(289)页,5.416 MB,由小橙橙上传
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兽医免疫学1兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第一章绪论第二章抗原第三章免疫系统第四章抗体第五章非特异性免疫第六章特异性免疫第七章变态反应第八章免疫学实验技术第九章免疫学防治技术2兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第一章绪
论第一节基本概念一.免疫(immunity)免疫最早的概念可能来自18世纪中国医书《免疫类方》,其意义是预防疾病或免除瘟疫。在古代西方医学上的免疫(immunity)一词,源于拉丁文“immunitas”,原系法律概念,意指免除奴役或免除捐税,后用到医学上意为免除感染。现代免疫
学认为:免疫是指生物机体在识别异己过程中,识别自我和排除异己,以维持机体内环境平衡和稳定的保护性生理反应。3兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二.免疫学(immunology)免疫学是研究生物体(动物、植物及微生
物等)抗原性物质、机体免疫系统(immunesystem)、免疫应答(immuneresponse)规律与产物、免疫调节(immunoregulation)及各种免疫现象的一门科学。现代免疫学不仅成为了一门独立的、富有生命力的学科,而且渗透到医学科学的各个领域,并与许多学科交织在
一起,发展成为免疫生物学、免疫生物化学、免疫生理学、免疫病理学、免疫药理学、分子免疫学及临床免疫学等。4兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第二节免疫的基本特性一.识别异己(recognitionofselfandnonsel
f)识别异己是动物机体产生免疫应答的基础。动物机体内含有很多免疫器官或免疫组织,其免疫细胞上的抗原受体(antigenicreceptor)能识别自身与非自身的大分子物质。二.特异性(specificity)指动物机体对某种抗原性物质产生的免疫应答具有高度的特异性,如嗜水气单胞菌疫苗刺激鱼类产生
的免疫保护,只对嗜水气单胞菌有抵抗力,而对其他病原的侵袭则无抵抗力。三.免疫记忆(immunologicmemory)指动物的免疫具有记忆功能,也就是指动物机体对初次刺激的抗原性物质具有长久的记忆能力,若当
同样抗原性物质再次刺激动物机体时,机体能迅速产生比初次更强的免疫应答反应。5兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第三节免疫的基本功能一.免疫防御(immunologicdefence)是指动物机体抵御病原
微生物的感染和侵袭的功能。当动物的免疫功能正常时,动物机体就能对由呼吸道、消化道、皮肤及粘膜等途径侵犯动物体内的各种病原微生物产生较强的抵抗力。二.自身稳定(immunologichomeostasi
s)是动物机体对在新陈代谢过程中产生的衰老细胞和受损细胞清除体外,从而维持机体的生理平衡的功能。三.免疫监视(immunologicsurveillance)是指动物机体识别和清除在各种因素诱导产生的突变细胞,以维持机体内细胞均一性的功能。6
兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等表1-1动物机体免疫的功能功能功能正常功能异常反应性正常反应性过高反应性过低免疫防御自身稳定免疫监视消灭病原微生物,中和毒素清除体内衰老和受损细胞识别和清除体内突变细胞变态反应自身免疫性疾病—免疫缺陷症—肿瘤或癌
症7兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第四节免疫学的发展简史一.原始免疫学时期也称为经验免疫学时期(11世纪到18世纪末),这是人类在长期实践和与疾病作斗争的过程中,积累出来的大量的朴素的免疫学知识。如约11世纪宋真宗时代,我国创立了天花患者干燥痂皮制成粉末吹鼻预防天花的种
痘法。18世纪末(1798年)英国医生EdwaedJenner受到挤奶工人大多不感染天花的启示,创立了应用牛痘脓疮制备疫苗(Vaccine)接种预防天花的接种方法即种痘法(Vaccination),至此才正式宣告“免疫学”的诞生。8兽医免疫学抗原抗体血清
学实验技术免疫检测技术等9兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等EdwardJenner(1749-1822年),13岁在Sodbury学医8年,1792年荣获医学博士学位。1796年5月14日他从挤奶女工接触牛痘而不生天
花这一现象得到了启发,把牛痘的脓泡液接种于健康的男孩,待反应消退之后再用同样方法接种天花,男孩不再发病。1798年他发表了开创新纪元的牛痘疫苗的报告。这一发现当时被称为Jenner牛痘疫苗接种,是人们与天花奋斗长达200年之久的最重要的武器。1980年5月8日在日内瓦召开的第33
届世界卫生大会(WHA)上宣布全球消灭天花。在免疫科学真正确立之前,Jenner的贡献是巨大的,所以人们通常把免疫学的起源归功于他。10兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二.传统免疫学时期也称为实验免疫学时期(18世纪末到20世纪初),这主要是由于微生物的病原
学研究取得了重大突破,推动免疫学在免疫机制的实验研究上也取得了大量的研究进展。如Pasteur成功研制了鸡霍乱、炭疽和狂犬病弱毒疫苗。Metchinikoff发现吞噬细胞的吞噬作用而提出了“细胞免疫学说
”;Ehrlich等发现抗毒素及抗体的抗菌作用,提出了“体液免疫学说”。这两个学派长期争论不休,直到20世纪初(1903年),Wright观察到免疫血清能显著地增强白细胞的吞噬作用,并将这种物质称为调理素,从而将细胞免疫与体液免疫有机地联系在一起,使免疫学的发展有
了个质的飞跃。11兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等LouisPasteur巴斯德(1822-1895年)是一位法国化学家、微生物学家和免疫学家。1880年他发现鸡霍乱杆菌的陈旧培养物能预防鸡霍乱的感染,首先创造了减毒疫苗。为了纪念一个世纪前Jenner的功勋,他将这种方
法称之为预防接种(vaccination),并将这种制剂称之为疫苗(vaccine),相继他又创造了炭疽杆菌减毒疫苗,狂犬病的减毒疫苗,兴起了主动免疫的方法(activeimmunization)。1
2兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等ElieMetchnikoff(俄,1846-1916)细胞免疫的倡导者,他在研究游走细胞即海星幼虫细胞的游走作用时,发现能吞噬外来的异物,并观察到水蚤的血液细胞能杀灭霉菌孢子,后来在兔及人体中用各种细胞进行
实验,也发现白细胞有吞噬各种细菌的作用,因此认为机体的免疫机制,主要就是以增强了吞噬功能的白细胞所发挥的吞噬作用,即细胞学说。1908年他与PaulEhrlich以关于抗体形成的侧链学说共获1908年
的诺贝尔生理和医学奖。13兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等EmilvonBehring(德,1854-1917)和北里柴三郎(日,Kitasato)用白喉脱毒外毒素注射动物(马),在动物血清中发现了一种能中和白喉外毒素的物质,称为抗毒素。以抗毒素对白喉患者进行治疗,发现此种中和毒素
的能力能被动地转移给正常动物,使后者获得抗白喉毒素的免疫力,因此称这种方法为人工被动免疫法。此后很多人从免疫动物或传染病病人血清中发现了多种能和微生物或其产物发生结合反应的物质,通称为抗体,而引起抗体产生的物质称为抗原。抗原和抗体因
能发生特异性结合,为诊断传染病建立了血清学诊断方法。此二人在1901年共同获得诺贝尔生理和医学奖。14兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三.现代免疫学时期自20世纪初以来,免疫学取得了巨大成就,主要表现在:1
.在免疫生物学方面提出了克隆选择学说,合理地解释了免疫特异性、免疫记忆、免疫识别和免疫耐受等核心问题。阐明了免疫器官、免疫细胞及免疫分子等在免疫应答中的国内和地位。明确了免疫系统的调控机制,如免疫分子的调节作用;免疫细胞间调节;神经与内分泌
的调节等。2.在免疫血清学方面建立了很多血清学技术,如凝集试验、补体结合试验、琼脂扩散试验、免疫荧光技术、免疫酶标技术、免疫放射技术等。15兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3.在免疫化学方面利用DNA重组技术,研制了多种基因工程疫苗;利用蛋白质技术研究
了人工合成肽疫苗。4.在免疫遗传学方面明确免疫应答是受到遗传基因的控制,一是主要组织相容性复合体(majorhistocompatibilitycomplex,MHC)基因,它编码的I类和II类分子,与淋巴细胞对抗原的识别、抗原提呈过程、免疫细胞间相互作用、细胞毒性作用等有重要关系。二是免疫
球蛋白的可变区基因,它决定抗体分子的特异性和多样性。另外,在肿瘤免疫、免疫病理、移植免疫、生殖免疫等也有了很大进展。16兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等冠状病毒模型冠状病毒体所携带的抗原17兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等天花病毒(Poxvirus)每个喷嚏可
产生100万个泡沫微粒天花发病过程7天3天5天18兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等19兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第五节免疫学的应用一.免疫学诊断主要指利用抗原抗体特异性结合的血清学技术对疾病的诊断。二.免疫预防主要指利用疫苗对
疫病的预防和控制。三.免疫治疗主要指利用抗血清对疫病的治疗,特别是对一些毒素性疾病的治疗。20兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等复习题1.免疫和免疫学的概念。2.免疫的基本特性。3.免疫的基本功能。4.现代免疫学的特点。21兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第二章抗原第
一节抗原的概念一.抗原(antigen)凡是能刺激动物机体产生抗体和致敏淋巴细胞并能与之特异性结合的物质。二.抗原性(antigenicity)包括免疫原性和反应原性两个方面含义。免疫原性(immunogenicity):指抗原能刺激动物机体产生抗体和致敏淋巴细胞的特性。反应原性(reac
tiongenicity):指抗原与相应抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合特性。22兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三.完全抗原和半抗原完全抗原(completeantigen):指具有免疫原性和反应原
性两种特性的物质。半抗原(incompleteantigenorhapten):指指具有反应原性而缺乏免疫原性的物质。四.免疫原(immunogen)指完全抗原,既能刺激机体产生免疫应答的物质。23兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术
等第二节构成抗原的条件构成抗原的物质需具备三个条件,即异物性、一定理化性状和完整性。一.异物性(foreigness)又称为异质性或异源性,包括以下几种情况:异种物质:不同种之间同种异体物质:同种不同个体之间自身抗原:自身组织成分通常无抗原性,但在以下几种情况下,可
成为抗原物质。24兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等自身成分成为抗原的情况:(1)隐蔽成分如眼晶体蛋白、甲状腺蛋白、脑组织及精子蛋白等,因各种因素如外伤、感染等而进入血液循环系统,可引起免疫反应。(2
)机体免疫系统识别功能紊乱,将自身物质视为异物,发生自身免疫病。(3)自身成分在烧伤、电离辐射、药物或感染等因素作用下,其结构发生改变而成为抗原物质。25兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二.一定理化性状抗原均为有机物,但有机物并非都是抗原。有机
物成为抗原,必须具备几个理化性状,包括大分子胶体、一定化学组成和结构、分子构象和易接近性和一定物理性状。1.大分子胶体完全抗原的分子量一般在10kD以上;分子量在5kD以下,一般无抗原性;分子量为5~10kD的物质,一般为弱抗原。2.一定化学组成和结构含支链氨基酸的
蛋白质,其抗原性较弱,如明胶(10kD以上)等;含芳香族氨基酸的蛋白质,其抗原性较强,如细菌荚膜多糖等。26兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3.分子构象和易接近性分子构象(conformation),指抗原分子一些特殊化学基团的三维
结构。易接近性(accessibility),指抗原分子化学基团与淋巴细胞表面相应抗原受体相互接触的难易程度。4.一定物理性状聚合体较单体的抗原性强;颗粒性物质较可溶性物质的抗原性强;在动物机体滞留时间长短,也能影响抗原引起的免疫应答。27兽医
免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三.完整性具备上述性状的物质,须经非消化道途径进入机体(包括注射、吸入、混入伤口等)并接触免疫细胞,才能成为良好抗原。另外,还应注意:抗原物质的免疫原性,一方面取决于抗原本身的特性
,另一方面也取决于机体的遗传特性(动物机体的免疫应答能力)。28兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第三节抗原特异性特异性(specificity),指物质之间的相互吻合性或针对性。抗原的特异性表现在两个方
面,即免疫原性的特异性和反应原性的特异性。特异性是免疫应答中最重要的特点,是免疫学诊断和防治的理论依据。29兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等一.抗原特异性的物质基础――抗原决定簇抗原决定簇(antigenicdete
rminant,AD),又称为表位(epitope),是存在于抗原表面的特殊化学基团,是免疫细胞识别的靶结构,也是免疫反应具有特异性的物质基础。抗原决定簇的大小相当于相应抗体的抗原结合部位。一般蛋白质的抗原决定簇由5~6个氨基酸残基组成。抗原的特异性是由这些氨基酸残
基所决定。一个抗原分子可具有一种或几种不同的抗原决定簇,每种决定簇只有一种抗原特异性。30兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二.抗原抗体反应的特异性主要表现:①抗原抗体反应具有高度特异性;②特异性是由抗原决定簇所决定;③抗原决定簇的空间位置对抗原特异性十分重要:抗原决定簇
相同,其位置不同,其特异性也不同;④抗原结构旋光度与其特异性有关。三.交叉反应(crossreaction)是指抗原(抗体)出与其相应抗体(抗原)发生特异性反应外,有时还能与其他抗体(抗原)发生反应。这是由于它们之间含有共同抗原(commomantigen)。31
兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第四节抗原分类一.根据抗原的性能可分为:完全抗原和半抗原二.根据抗原的亲缘关系可分:异种抗原、同种异体抗原和自身抗原三.根据抗原来源可分:外源性抗原和内源性抗原32兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技
术等四.根据抗原在免疫应答中是否需要T细胞辅助,可分为:胸腺依赖性抗原(thymusdependentantigen,TDAg),指其在巨噬细胞和T细胞参与下才能激活B细胞产生抗体。如血细胞、血清蛋白、细菌等。非胸腺依赖性抗原(thymusindependentant
igen,TIAg),指其刺激机体B细胞产生不需要T细胞辅助。如细菌脂多糖、荚膜多糖等。33兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第五节医学上重要抗原一.微生物及其代谢产物如细菌、病毒等,还有其代谢产物如外毒素(类毒素)。二.动
物免疫血清免疫血清,对本种动物具有治疗疾病的作用;对另一种动物,则是异种蛋白,具有抗原性。三.同种异体抗原在同种动物的不同个体之间,由于遗传基因的不同,组织器官中存在着不同的抗原成分,即同种异体抗原。四.自身抗原34兽医免
疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等五.异嗜性抗原(heterophilantigen)指一类与种属特异性无关的、存在于人、动物、植物及微生物中的共同抗原。这是引起自身免疫性疾病的原因之一。如A族溶血性链球菌与肾小球基底膜和心肌组织存在异
嗜性抗原;大肠杆菌O14型脂多糖与人结肠粘膜具有异嗜性抗原。35兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第六节免疫佐剂一.概念免疫佐剂(immunoadjuvant),简称佐剂(adjuvant),是指先于抗原或
与抗原一起注入动物机体,可增强机体对抗原的特异性免疫应答或改变免疫应答类型的一类物质。二.佐剂的种类一般可分为:①无机佐剂,如氢氧化铝、明矾等;②有机佐剂,如卡介苗、内毒素等;③合成佐剂,如双链多聚核苷酸、胞苷酸
等;④油剂,如弗氏佐剂、植物油、矿物油等。36兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三.佐剂的生物学作用佐剂的生物学作用有:①增强抗原的免疫原性;②提高初次应答和再次应答的抗体滴度;③改变抗体类型,由产生IgM转变为产生IgG;④引起
或增强迟发型超敏反应。四.佐剂的作用机制①改变抗原物理性状,利于抗原缓慢释放,延长滞留时间;②利于抗原被巨噬细胞吞噬,促进抗原提呈;③刺激淋巴细胞增殖和分化,增强和扩大免疫应答能力。37兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等五.超抗原(supperantigen,S
Ag)指某些物质在极少浓度(1~10ng/mL)情况下就能诱发动物机体产生最大的免疫应答效应。如金黄色葡萄球菌A~E肠毒素、A族链球菌M蛋白等。38兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等1.抗原2.免疫原性3.抗原性4.抗原决定簇5.TD-
Ag6.TI-Ag7.超抗原8.异嗜性抗原39兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第三章免疫系统Immunesystem机体内参与对抗原的免疫应答,执行免疫功能的一系列器官、细胞和分子。40兽医
免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等41兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第一节免疫器官猪免疫器官示意图包括中枢免疫器官和外周免疫器官42兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等鸡免疫器官示意图4
3兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等1.骨髓(bonemarrow)是体内重要的造血器官。出生后一切血细胞均源于骨髓。同时骨髓也是各种免疫细胞发生和分化的场所。骨髓中的多能干细胞首先分化成髓样干细胞和淋巴干细胞,前者进
一步分化成红细胞系、单核细胞系、粒细胞系等;后者则发育成各种淋巴细胞的前体细胞。一部分淋巴干细胞分化为T细胞的前体细胞,随血流进入胸腺后,分化为成熟的淋巴细胞称为胸腺依赖性淋巴细胞,简称T细胞,参与细胞免疫。一.中枢免疫
器官——免疫细胞产生与成熟场所包括骨髓、胸腺和禽法氏囊44兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等另一部分淋巴干细胞分化为B细胞的前体细胞,随血流进入腔上囊(鸟类)或骨髓(哺乳动物)发育为成熟的淋巴细胞称囊依赖性淋巴细胞,简称B细胞,参与体
液免疫。骨髓也是形成抗体的重要部位,用抗原免疫动物后,骨髓可缓慢、持久地大量产生抗体,所以骨髓也是重要的外周免疫器官。45兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2.胸腺(thymus)胸腺的大小随年龄不同而异,相对大小在初生时最大,但其绝对大
小在发育期最大。成长后,胸腺实质萎缩退化。胸腺小叶是胸腺的基本结构单位,其外周是皮质,中心是髓质。胸腺是T细胞分化成熟的中枢免疫器官,新生期摘除胸腺的小鼠在成年后体内淋巴细胞显著减少,不能排斥异体移植皮肤,对抗体生成反应也有严重影响。切除成年动物胸腺的后果不太严重。46兽医免疫
学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等胸腺的免疫功能:(1)T细胞成熟的场所骨髓中的前T细胞随血流进入胸腺,先后在皮质和髓质,分化增殖为成熟的具有不同功能的T细胞亚群。成熟的T细胞经血流输至全身,参与细胞免疫。(2)产生胸腺激素
胸腺上皮细胞可产生多种小分子的肽类胸腺激素,如胸腺血清因子、胸腺素、胸腺生成素和胸腺体液因子等,它们诱导T细胞分化、增殖、成熟为T细胞。47兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等免疫细胞诱生示意图48兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3.腔上囊(bursa)亦称法氏囊,为鸟
类所特有的中枢免疫器官。性成熟前达到最大,后逐渐萎缩退化消失。腔上囊是B细胞诱导分化和成熟的场所。来自骨髓的淋巴干细胞在其内诱导分化为成熟的B细胞,经淋巴和血液循环到外周淋巴器官参与体液免疫。腔上囊分泌的囊素对B细胞分化、成熟
有重要作用。49兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等胚胎后期或初孵出的雏禽切除腔上囊,则体液免疫应答受到抑制,浆细胞减少或消失,接受抗原刺激后不能产生抗体,但切除腔上囊对细胞免疫则影响很小,被切除的雏禽仍能排斥皮肤移植。
某些病毒感染(如传染性囊病)及某些化学药物(如注射睾丸酮)等均能使囊萎缩,如果鸡场存在传染性囊病则易导致免疫失败。50兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二.外周免疫器官——免疫细胞分布及进行免疫应答的场所又称次级(二级)免疫器官,是成熟的T细胞和B细胞
定居、增殖和对抗原刺激进行免疫应答的场所。它包括脾脏、淋巴结和淋巴样组织等。这类器官富含捕捉和处理抗原的巨噬细胞、树突状细胞和朗罕细胞等,能速捕获处理和递呈抗原给免疫活性细胞。。51兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等1.淋巴结遍布于淋巴循环径路的各
个部位,以便捕获从机体外部进入淋巴液的抗原。皮质区中含有淋巴小结(主B细胞),又称囊依赖区。接触抗原刺激后,B细胞分裂增殖形成生发中心,内含不同分化阶段的B细胞和浆细胞。副皮质区为淋巴小结和髓质之间。淋
巴小结周围和副皮质区(主T细胞),故称胸腺依赖区。52兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等髓质由髓索和髓窦组成。髓索中含有B细胞、浆细胞和巨噬细胞等。髓窦位于髓索之间为淋巴液通道,与输出淋巴管相
通。淋巴结内免疫应答生成的致敏T细胞及特异性抗体可汇集于髓窦中随淋巴液循环进入血液循环分布到全身发挥作用。猪淋巴结的结构相反,髓质的部分在淋巴结外层。鸡无淋巴结,但淋巴组织广泛分布于体内,有的为弥散性;有的为淋巴集结,如盲肠
扁桃体;有的呈小结状等,它们在抗原刺激后都能形成生发中心。鹅、鸭等水禽有两对淋巴结,即颈胸淋巴结和腰淋巴结。53兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等淋巴结的免疫功能(1)过滤和清除异物作用侵入机体的致病菌
、毒素或其他有害异物,通常随组织淋巴液进入局部引流淋巴结内,淋巴窦中的巨噬细胞有效地吞噬和清除细菌等异物。(2)产生免疫应答的场所淋巴实质中的巨噬细胞等捕获处理外来抗原,并将抗原递呈给T细胞和B细胞,使其活化增殖,形成致敏T细胞和浆细胞,使生发中心增大。54兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫
检测技术等2.脾脏实质分为两部分,一部分贮存红细胞,捕获抗原和生成红细胞,称为红髓;另一部分发生免疫应答,称为白髓。红髓量多,位于白髓周围,由脾索和脾窦组成,含大量B细胞、浆细胞、巨噬细胞等,由脾索围成的脾窦内充满血液。白髓内沿
中央动脉周围的淋巴组织称淋巴鞘(主T细胞),称胸腺依赖区。白髓内有淋巴小结和生发中心,含大量B细胞,为非胸腺依赖区。55兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等脾脏的免疫功能:(1)血液滤过作用脾脏中的巨噬细胞等可吞噬清除混入血液的细菌等异物和自身衰老伤残的血细胞等废物。(2
)滞留淋巴细胞的作用当抗原进入脾脏,淋巴细胞的滞留,使抗原敏感细胞集中到抗原附近,增进免疫应答效应。(3)产生免疫应答的重要场所脾脏内定居着大量淋巴细胞和其他免疫细胞,抗原一旦进入脾脏即可发生T细胞和B细胞的活化和增殖,产生致敏T细胞和浆细胞。脾脏是体内产生抗体的主要器官。(4)产生吞
噬细胞增强激素脾脏能产生一种含苏赖脯精四种氨酸组成的四肽激素,能增强巨噬细胞的吞噬作用。56兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(三)粘膜免疫系统(membraneimmunesystem)呼吸道消化
道泌尿生殖道腺体分泌管作用:接受粘膜表面侵入抗原的免疫应答大量产生分泌性抗体IgA,分布在粘膜表面起粘膜免疫保护粘膜下免疫细胞包括T、B、Mφ、DC等57兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(四)禽哈德氏腺(Hardergland)◼分布T细胞、
B细胞◼鸡新城疫Ⅱ系苗滴眼免疫起重要作用58兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第二节免疫细胞凡参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞统称为免疫细胞。免疫活性细胞:在免疫细胞中,接受抗原物质刺激后能分化增殖,
产生特异性免疫应答的细胞,称为免疫活性细胞(ICC),主要为T细胞和B细胞。在免疫应答中起核心作用。免疫辅佐细胞在免疫应答过程中起重要的辅佐作用,故称免疫辅佐细胞(Acell)。能捕获和处理抗原以及能把抗原递呈给免疫活性细胞,如单核吞噬细胞和树突状细胞
等。59兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等一、T细胞和B细胞1.来源、分布与作用T细胞和B细胞均来源于骨髓多能干细胞。多能干细胞分化为前T细胞和前B细胞。T细胞:前T细胞进入胸腺发育为成熟的T淋巴细胞(胸腺依赖性淋巴细胞),简称T细胞。成熟的T细胞经血流分布到外周免疫器
官的胸腺依赖区定居和增殖,并可经血液-组织-淋巴-血液再循环巡游全身各处。执行细胞免疫功能。B细胞:前B细胞在骨髓(哺乳类)或腔上囊(鸟类)分化发育为成熟的B淋巴细胞,又称骨髓依赖性淋巴细胞或囊依赖性淋巴细胞
(B细胞)。B细胞分布在外周淋巴器官的非胸腺依赖区定居和增殖。发挥体液免疫功能。60兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2.表面标志T、B淋巴细胞表面存在着大量不同种类的蛋白质分子,这些表面分子又称为表面标志,表面标志包括表面受体和表面抗原,可用于鉴别T细胞和B细胞及其
亚群。表面受体是指淋巴细胞表面上能与相应配体(特异性抗原等)发生特异性结合的分子结构。表面抗原是指在淋巴细胞表面上能被特异性抗体识别的表面分子。61兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(1)T细胞抗原受体(Tcellrecepter,TCR)组成
:α、β二条肽链多样性:一个个体有1015克隆(株)Tc作用:识别结合抗原,引起T细胞的免疫应答。(2)B细胞抗原受体(Surfacemembraneimmunoglobuling,SmIg)未成熟B细胞SmIgM成熟B细胞SmIgM+S
mIgD每个动物体内约有107B细胞克隆(株),每个克隆B细胞SmIgM,SmIgD都不同,各识别结合一种抗原(每个B细胞105个SmIg)SmIg多样性的基因水平机制与TCR相似作用:识别结合抗原,引起B细胞
的免疫应答62兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(3)T细胞表面抗原(标志)分化不同时期的T细胞,表达不同蛋白质分子,称为分化抗原(Clusterofdifferentiation,CD)CD2单链多肽,在成熟Tc上,ERCD35-6链多肽,在
成熟Tc上,与TCR/CD3传递抗原信息CD4单链多肽,在Th上,辅助TH的TCR识别抗原,如人爱滋病毒(HIV)受体CD8双链多肽,在Tc上,辅助Tc的TCR识别抗原(4)B细胞表面抗原目前研究资料还不多。63兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术
等二、K细胞和NK细胞NK细胞和K细胞具有非特异性杀伤功能,这些细胞直接来源于骨髓。1.杀伤细胞(Kcell)简称K细胞,其主要特点是细胞表面具有IgG的Fc受体。当靶细胞与相应的IgG结合,K细胞可与结合在靶细胞上的IgG的Fc
结合,释放细胞毒,裂解靶细胞,这种作用称为抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)。分布与作用K细胞主要存在于腹腔渗出液、血液和脾脏中。K细胞杀伤的靶细胞包括病毒感染细胞、肿瘤细胞、异体细胞及较大的病原体(如寄生虫)等,故K细胞在抗肿瘤免疫和移植物排斥反应、清除自身的衰老细胞等方面有
一定意义。64兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2.自然杀伤细胞(NKcell)简称NK细胞,是一群既不依赖抗体不需要抗原刺激就能杀伤靶细胞的淋巴细胞,因而称为自然杀伤性细胞。NK细胞表面存在着识别靶细
胞表面分子的受体结构,通过此受体与靶细胞结合而发挥杀伤作用。65兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等NK细胞表面也有IgG的Fc受体,凡被IeG结合的靶细胞均可被NK细胞通过其FC受体的结合而导致靶细胞溶解,即NK细胞也具有ADCC作用。分布与作用NK细胞主要存
在于外周血和脾脏中。NK细胞的主要生物学功能为杀伤肿瘤细胞、杀伤病原微生物、排斥骨髓移植细胞。NK细胞对生长旺盛的细胞如骨髓细胞和B细胞有一定的杀伤作用,表明NK细胞也有免疫调节作用。NK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用是广谱的,因有免疫监视作用。66兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三、辅佐
细胞对抗原进行捕捉、加工、处理和递呈的一类免疫细胞称为免疫辅佐细胞简称A细胞。由于A细胞将抗原递呈给抗原特异性淋巴细胞,故又称抗原递呈细胞(APC),如单核吞噬细胞和树突状细胞等。1.单核吞噬细胞(Mф
)包括血液中的单核细胞和组织中的巨噬细胞。单核细胞表面具有多种受体,例如IgG的Fc受体、补体受体,均有助于吞噬功能的进一步发挥。巨噬细胞表面有较多的MHCⅠ类和Ⅱ类分子,与抗原递呈有关。67兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等单核巨
噬细胞单核细胞体积较大,蹄状核(左,普通光镜)。透射电镜显示其高尔基体发达、线粒体丰富、胞浆颗粒明显(中)。扫描电镜显示腹腔巨噬细胞粘附于玻璃表面(右)。68兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等组织相容性复合体(MHC)组织相容性的概念源于对组织移植排斥现象的研究。发现同中异体
细胞或组织移植时,可发生排斥反应。只有遗传性完全相同的动物可以互相移植不引起排斥反应。排斥反应所针对的抗原是一种存在与细胞表面的糖蛋白,称组织相容性抗原。组织相容性抗原包括多种复杂的抗原系统。控制组织相容性抗原结构的基因称为组织相容性基因,
该基因为染色体上的一组基因连锁群,不仅编码组织相容性抗原,还控制和调节免疫应答及支配免疫细胞个亚群的协调作用,称该基因连锁群为组织相容性复合体(MHC)。组织相容性复合体(MHC)有三类重要位点:第Ⅰ类位点(MHCⅠ类)编码移植反应抗原分子;第
Ⅱ类位点(MHCⅡ类)编码包括调节淋巴细胞增生和相互作用及免疫强度的基因(包括免疫调节基因);第III类位点(MHCIII类)编码控制某些补体成分和补体受体产生的基因。69兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测
技术等单核吞噬细胞具有以下免疫功能(1)吞噬和杀伤作用组织中的巨噬细胞可吞噬和杀灭多种病原微生物和处理衰老损伤细胞。巨噬细胞可在抗体存在下发挥ADCC作用。(2)递呈抗原作用在免疫应答中,巨噬细胞首先吞噬外来抗原,经胞内酶降解为抗原决定簇小片段,随后这些抗原片段与MHCⅡ类分子结合形成抗原片段—
MHCⅡ类分子复合物,并移向细胞表面,以便向具有相应抗原受体的T细胞和B细胞递呈。(3)合成和分泌各种活性因子巨噬细胞能合成和分泌50余种生物活性物质,如许多酶类(蛋白酶、溶菌酶)、白细胞介素1、干扰素和前列腺素、补体等。70兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2.树突状细胞(
DC)和郎罕细胞(LC)来源于骨髓,主要分布在脾和淋巴结,无吞噬能力。细胞有MHCⅡ类分子、FC受体和C3b受体,可通过结合抗原抗体复合物将抗原递呈给淋巴细胞。3.B细胞兼具有A细胞功能,能将某些抗原决定簇递呈给T细胞以引起免疫应答。71兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免
疫检测技术等4.其他免疫细胞(1)粒细胞:胞浆中含有颗粒的白细胞统称粒细胞,分为中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。它们来源于骨髓,寿命较短,为在外周血中维持恒定的数目,须由骨髓不断地供应。粒细胞由于有分叶状的细胞核,又称多形核白细胞。中性粒细胞:是血液中的主要吞噬细胞,具有高度的移
动性和吞噬功能。细胞表面有Fc及Ob受体。它在防御感染中起重要作用,并可分泌炎症介质,促进炎症反应并可处理颗粒性抗原提供给巨噬细胞。嗜酸性粒细胞:含有多种酶,尤其富含过氧化物酶。在寄生虫感染及I型超敏反应性疾病中常见嗜酸性粒细
胞数目增多。杀伤虫体,吞噬抗原抗体复合物,在I型过敏反应中发挥负反馈调节作用。72兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等73兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(3)嗜碱性粒细胞:嗜碱性粒细胞参与I型过敏反应,细胞表
面有IgE的Fc受体,能与IgE结合,带IgE的嗜碱性粒细胞与特异性抗原结合后,引起过敏反应。另外还有:(4)肥大细胞:存在于周围淋巴组织、皮肤的结缔组织,Fc受体、在I型过敏反应中的作用与嗜碱性粒细胞十分相
似。(5)红细胞:研究表明红细胞和白细胞一样具有重要的免疫功能,它具有识别抗原、清除体内免疫复合物、增强吞噬细胞的吞噬特别是在小血管周围、脂肪组织和小肠黏膜下组织等中。肥大细胞表面有IgE功能、递呈抗原和免疫调节等功能。74兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等中性粒细胞75
兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等肥大细胞和嗜碱粒细胞活化方式76兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等嗜酸性粒细胞77兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第三节免疫分子指机体内参与调节免疫应答的各种蛋白分子免疫细胞膜上分子
TCRBCR(SmIgMSmIgD)白细胞分化抗原(CD)MHC分子体液中免疫分子免疫球蛋白补体系统细胞因子机体各种细胞分化不同群时在成熟不同阶段、活化不同时期时出现于膜上的蛋白质分子不同,以clusterofdiffertiation,CD命名,例如成熟T细胞都有CD2、CD3,分化
成TH则有CD4,Tc有CD8等,CD分子在细胞发挥功能时起作用78兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等一、补体系统(complementsystem)是由存在于人和脊椎动物血清及组织液中的一组经活化后具有酶样活性的蛋白质,以及其调节蛋白和相关膜蛋白(受体)共
同组成的系统。(一)补体系统概述1.补体系统组成(1)固有成分:C1(C1q,C1r,C1s)-C9、B、D、P因子、MBL、丝氨酸蛋白酶。(2)调节分子:①可溶性调节因子。②膜结合性调节分子。(3)受体成分:C1qR,
CR1,CR2,CR3,C3aR,C5aR等。79兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2.补体成分命名(1)固有成分:用C后加阿拉伯数字表示,如C1,C4,C2等。(2)其他成分:用英文大写字母表示,如B因子、D因子、P
因子、H因子等。(3)裂解片段:小片段用a表示,如C3a;大片段用b表示,如C3b。(4)酶活性成分:符号上划一横线,如C3bBb。(5)灭活补体片段:符号前加i表示,如iC3b。80兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3.补体的一般性质(1)主要产生
细胞为肝细胞和巨噬细胞。(2)多数组分为糖蛋白。(3)血清中各成分含量不等,C3含量最多,D因子最少。(4)正常生理情况下,以非活化形式存在。(5)性质不稳定,加热56℃,30min失活。(二)补体系统的三条激活途径经典途
径(classicalpathway)旁路途径(alternativepathway)MBL途径(MBLpathway)81兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等1.经典(传统)激活途径(1)激活剂Ag-Ab复合物(IgG、IgM)(2)参与成分C1-C9识别阶段(3)激活过程(三个阶段)
:活化阶段膜攻击阶段82兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等83兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等84兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2.旁路(替代)激活途径(1)激活剂:酵母、细菌的多糖成分(LPS);凝聚的IgA、
IgE等。(2)参与成分:B、D、P因子、C3、C5-C985兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3.MBL(甘露糖结合凝集素)激活途径(1)激活剂MBL(mannan-bindinglectin)MBL(2)MBL复合物MASP-1(MBL-associate
dserineprotease-1)MASP-286兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等补体激活途径的相互关系经典(传统)途径替代(旁路)途径激活C5细胞裂解甘露糖凝集素途径非抗体依赖激活C3形成C5转化酶抗体依赖87兽医免疫学抗原抗
体血清学实验技术免疫检测技术等88兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(三)补体的生物学功能主要包括MAC的生物效应;活化补体片段的生物效应。1.MAC介导的细胞裂解作用补体系统活化→膜攻击复合物→溶解靶
细胞(如奈瑟细菌等G阴性菌,异型红细胞等)2.补体活化片段介导的生物学作用(1)调理作用Ag(颗粒性)-Ab复合物→C3b、C4b、iC3b→结合于吞噬细胞CR→吞噬免疫复合物。89兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(2)
免疫复合物清除作用Ag-Ab复合物(可溶性)→C3b或C4b→与血细胞(如红细胞、血小板)CR结合→吞噬清除。(3)炎症介质作用A.过敏毒素作用:过敏毒素C5a、C3a和C4a、C5a、C3a→肥大细胞和嗜
碱性粒细胞(C5aR、C3aR)→释放活性介质(如组胺、白三烯及前列腺素等)→过敏性病理变化。B.趋化作用:趋化因子C5a、C3a、C4a和C5b67C5a、C3a→吞噬细胞向感染部位聚集→炎症反应。C.激肽样作用:C2aC4a能增强血管通透性→炎性渗出和水肿(4)免疫调
节作用:A.C3b促吞噬细胞作用;B.与B细胞表面CR1结合促B细胞增殖分化90兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二、细胞因子(一)细胞因子概述细胞因子(旧称淋巴因子)是免疫细胞和非免疫细胞受抗原或丝裂原刺激后产生的非抗体、非补体的具有激素样活性的蛋白质分子。在免疫应答
和炎症反应中有多种生物学活性作用。许多细胞能够产生细胞因子,主要有三类:第一类是活化的免疫细胞;第二类是基质细胞类,包括血管内皮细胞、成纤维细胞、上皮细胞等;第三类是某些肿瘤细胞:抗原刺激、感染、炎症等许多因素都可刺激细胞因子的产生,而且细胞因子之间也可彼此促进合成
和分泌。91兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(二)细胞因子的共同特性1.多数为低分子量的多肽或糖蛋白(1)分子量6-60KD,<200aa(2)存在形式:分泌型(3)组成1)单体:大多数,如IL-2、IL-3、IL-IL-5、IFN-α;2)二聚体
同二聚体:IFN-、IL-10异二聚体:IL-12;3)三聚体TNF。2.合成与分泌特性(1)多源性;(2)多向性;(3)短时自限性分泌;92兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3.作用特性(1)高效性10-12mol/L;(2)主要为自分泌、旁分泌效应;(3)非特异性、多
效性及重叠性;(4)拮抗性;(5)双重性;(6)网络效应;(7)细胞因子与激素、神经肽和神经递质共同组成细胞间信号分子系统。93兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(三)细胞因子的种类与功能白细胞介素interleukins,ILs干扰素interferon,IFN肿瘤
坏死因子tumornecrosisfactor,TNF集落刺激因子colony-stimulatingfactor,CSF趋化因子chemokines生长因子growthfactor,GF---六大类(按功能分类)94兽
医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等1.白细胞介素(interleukins,ILs)指能够介导白细胞间及其他细胞间相互作用的细胞因子。(1)IL-1(又称淋巴细胞刺激因子)细胞来源:主要由活化的单核-巨噬细胞产生。存在形式:IL-1α和IL-1β。主要生物学功能:A.局部低浓度-
-免疫调节:协同刺激APC和T细胞活化,促进B细胞增殖和分泌抗体。B.大量产生--内分泌效应:诱导肝脏急性期蛋白合成;引起发热和恶病质。95兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(2)IL-2(又称T细胞生长因子,TCGF)细胞来源:主要由T细胞产生。作用方式:以自分泌和旁分泌方式发
挥效应。主要生物学功能:a.活化T细胞,促进细胞因子产生;b.刺激NK细胞增殖,增强NK杀伤活性及产生细胞因子,诱导LAK细胞产生;c.促进B细胞增殖和分泌抗体;d.激活巨噬细胞。96兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测
技术等(3)IL-4细胞来源:由Th2细胞、肥大细胞及嗜碱性粒细胞产生。主要功能:a.促B细胞增殖、分化;b.诱导IgG1和IgE产生;c.促进Th0细胞向Th2细胞分化;d.抑制Th1细胞活化及分泌细胞因子;e.协
同IL-3刺激肥大细胞增殖等。(4)IL-6细胞来源:由单核巨噬细胞、Th2细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞产生。主要功能:a.刺激活化B细胞增殖,分泌抗体;b.刺激T细胞增殖及CTL活化;c.刺激肝细胞合成急性期蛋白,参与炎症反应d.促进血细胞发育。97兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技
术等(6)IL-12细胞来源:主要由单核-巨噬细胞、B细胞产生主要功能:a.激活和增强NK细胞杀伤活性及IFN-产生;b.促进Th0向Th1细胞分化,分泌IL-2、IFN-;c.增强CD8+CTL细胞杀伤活性;d.可协同IL-
2诱生LAK细胞;e.抑制Th0细胞向Th2细胞分化和IgE合成。(5)IL-10细胞来源:主要Th2细胞和单核巨噬细胞产生主要功能:a.抑制前炎症细胞因子产生;b.抑制MHC-II类分子和B-7分子的表达;c.抑制T细胞合成IL-2、IFN-等细胞因子;d.可促进B细胞分化
增殖。98兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2、干扰素(interferon,IFN)干扰素是由干扰素诱导剂作用于活细胞后,由细胞产生的一种低分子糖蛋白,能抑制多种病毒的生长和繁殖。人干扰素α干扰素(白细胞干扰素)β干
扰素(成纤维细胞干扰素)γ干扰素(免疫干扰素)99兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等名称氨基酸数受体产生细胞功能IFN-α166CD118白细胞抗病毒,促进MHCI类分子的表达IFN-β166CD118成纤维细胞抗病毒,促进MH
CI类分子的表达IFN-143CD119T细胞、NK细胞激活巨噬细胞,促进MHC分子表达和抗原提呈,抑制Th2细胞三类干扰素的区别100兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等干扰素的生物学活性(1)抑制病毒复制:
抗病毒作用无特异性,是广谱抗病毒物质,但具有种属特异性。(2)抑制癌细胞分裂。(3)活化单核巨噬细胞。干扰素的作用机制本身对病毒无灭活作用,主要作用于正常细胞使其产生一种抗病毒蛋白,这种蛋白可干扰病毒mR
NA的翻译,从而抑制了新病毒的合成。101兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等102兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等103兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3、肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor
,TNF)根据来源和结构不同,可分为TNF-α、TNF-β(1)TNF-α组成及分子量:同源三聚体,51KD。细胞来源:单核巨噬细胞;T细胞、NK细胞和肥大细胞。主要功能:A.低浓度时(自分泌、旁分泌效应)a.诱导炎症反应:使血管内皮细胞表达ICAM-1,促白细胞聚
集于炎症局部;刺激单核巨噬细胞等合成、分泌细胞因子(如IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α等),导致炎性细胞浸润和增强吞噬细胞的杀伤。b.促进MHC-I类分子表达,增强CTL对靶细胞的杀伤。c.杀伤肿瘤细
胞直接杀伤,引起组织出血坏死。B.高浓度(内分泌效应):引起发热;协同IL-1、IL-6诱导肝细胞合成急性期蛋白;制骨髓造血干细胞的分裂;引起代谢紊乱,导致恶液质;介导内毒素致感染性休克。104兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(2)TNF-β又称淋巴毒素(lym
photoxin,LT)与TNF-α的氨基酸序列为28%同源性,二者结合同一受体。细胞来源:激活的T细胞。生物学功能:A.与TNF-α相似,在局部发挥效应;B.与细胞表面LT-β形成复合物,发挥作用。105兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等4、集落刺激因子(colo
ny-stimulatingfactor,CSF)概念:选择性刺激造血干细胞分化发育成某一细胞谱系的细胞因子的统称。包括:SCF、Flt3L、GM-CSF、G-CSF、M-CSF、EPO、TPO、IL-3(m
ulti-CSF)、IL-7等。106兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等5.趋化因子(chemokines)概念:吸引白细胞向一定方向移行,也可刺激白细胞活化的小分子蛋白。分类:(1)CXC亚族(α亚族):如白细胞介素-8(
IL-8),主要来源于活化的单核-巨噬细胞、内皮细胞、成纤维细胞和巨核细胞。其主要功能是趋化中性粒细胞,介导炎症反应。(2)CC亚族(β亚族):如MCP-1(单核细胞趋化蛋白-1),来源于活化的T细胞;主要功能是趋化并活化单个核细胞(单核细
胞和T细胞)。(3)C亚族(γ亚族):如lymphotactin-α和lymphotactin-β,其主要功能是趋化淋巴细胞。(4)CX3C亚族(δ亚族):如Fractalkine,其主要功能是趋化淋巴细胞和巨噬细胞。107兽
医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等6、生长因子(growthfactor,GF)(1)包括:TGF-β(transforminggrowthfactor-β,转化生长因子-β);EGF(epithelialgrowthfactor,表皮生长因子);FGF(fibroblastgrowth
factor,成纤维细胞生长因子);NGF(nervegrowthfactor,神经生长因子);PDGF(platelet-derivedgrowthfactor,血小板源性生长因子);VEGF(vascularendothelialcellgrowthfactor,血管内皮细胞生长因子
)108兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(2)TGF-:细胞来源:T细胞、B细胞、巨噬细胞及肿瘤细胞等生物学功能(免疫抑制调节剂):抑制T细胞增殖和细胞因子产生;抑制B细胞增殖和T细胞依赖性多克隆抗
体的产生;抑制NK细胞活化和IL-2的LAK细胞诱导作用;抑制Mφ活化和前炎性细胞因子产生;抑制多种细胞增殖,但促成纤维细胞增殖,加速伤口愈合;某些肿瘤细胞分泌TGF-,可逃避免疫应答。109兽医免疫学抗原抗体血清学实验技
术免疫检测技术等1.免疫系统的构成2.中枢免疫器官的组成与功能3.外周免疫器官的组成与功能4.免疫细胞的组成5.免疫活性细胞概念及其表面标志6.各种免疫辅助细胞的功能7.补体系统的概念与激活途径8.细胞因子的概念与共有特性110兽
医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第四章抗体第一节基本概念一、免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)是指存在于人和动物血液(血清)、组织液及其它外分泌液中的一类具有抗体活性或与抗体具有相似结构的球蛋白。二、抗体(Antibody)是
指人和动物受到抗原物质刺激后,由B淋巴细胞转化为浆细胞后产生的,能与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。抗体是动物机体对抗原物质产生免疫应答的重要物质,主要存在于人和动物的血液(血清)、组织液及其它外分泌液中,因此将抗体介导的免疫称为体液免疫(humoralimmunity)。111
兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三、免疫球蛋白与抗体的关系抗体是免疫学和功能上的概念,是抗原的对立面,是具有针对性,其本质就是免疫球蛋白。而免疫球蛋白是结构和化学本质上的概念,它们并不都具有抗体活性。也就是说抗体一定是免疫球蛋白,而免疫球蛋白不一定是抗体。另外
,从分子多样性上看,抗体具有多样性,即动物机体可产生针对各种抗原物质的抗体;而免疫球蛋白就其化学结构的差异,只可分为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。112兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第二
节免疫球蛋白的结构一、基本结构1.四肽链结构两条重链(heavvychain,H链)两条轻链(Lightchain,L链)每条重链和轻链都有氨基端(N端)和羧基端(C端)。113兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等在N端,含轻链1/2和重链1/4的区域,其氨基酸排列顺序
随抗体特异性不同而有所变化,故称为可变区(variableregion,V区);而C端,含轻链1/2和重链3/4的区域,其氨基酸较稳定,称为恒定区(constantregion,C区)。114兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等115兽医免疫学抗原抗体血清学实
验技术免疫检测技术等2、接合链(Joiningchain,J链)使Ig单体结合在一起的多肽链,起稳定多聚体的作用。3、分泌片(secretorypiece,SP)是IgA分子上的一条分子量为60~70kD的多肽链,其功能是
保护IgA不受环境中酶破坏,并介导IgA转运。116兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二、Ig的功能区1.抗原结合部位:VH和VL;2.遗传标记区域:CH1;3.补体结合位点:CH2;4.Fc受体结合位点:CH3。117兽医免疫学抗原
抗体血清学实验技术免疫检测技术等三、Ig水解片段木瓜水解酶可将Ig水解成2个Fab段和1个Fc段胃蛋白酶可将Ig水解成一个含双价抗体活性的F(ab”)段和若干小分子多肽碎片。118兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫
检测技术等Fab片段的生物学活性抗体结合抗原的活性由Fab所呈现,由VH和VL所组成的抗原结合部位,可结合抗原,是决定抗体分子特异性的部位。Fc片段的生物学活性该片段无结合抗原活性,但与抗体分子的生物学活性有密切关系:1.选择性地通过胎盘;2.与补
体结合活化补体;3.决定Ig分子的亲细胞性(与Fc受体细胞结合);4.Ig通过粘膜进入外分泌液。119兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等四、5类Ig结构IgG、IgD和IgE为单体结构;IgA为二聚体;IgM为五
聚体。120兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第三节免疫球蛋白的类别和血清型一、Ig的类别1、类(class)根据Ig重链恒定区结构差异(γ、α、μ、δ及ε),可将Ig分为IgG、IgA、IgM、IgD和
IgE。2、亚类在同一类Ig中,因重链分子结构差异及二硫键位置与数目不同,可将IgG分为IgG1、IgG2、IgG3和IgG4四个亚类;IgA分为IgA1、IgA2和IgA3;IgM分为IgM1和IgM2。IgD和IgE没有亚
类。121兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二、Ig血清型1、同种型(isotype)是指同一物种所有个体Ig分子所共有的抗原特异性。2、同种异型(allotypes)是指同一物种不同个体Ig分子所具有的不同抗原特异性。3、独特型(idiotype,Id)Ig分子在VL和
VH高变区上存在一定的氨基酸序列差异,这是由于抗原存在不同抗原决定簇所致。由若干个抗原决定簇组成抗原独特型,它刺激机体产生的抗体,称为抗独特型抗体(AId)。122兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第四节Ig生物合成和基因调控一、Ig的合成与装配1.
形成抗体的组织细胞形成抗体的组织细胞主要是脾、淋巴结及其它淋巴组织内的浆细胞2.Ig生物合成与装配通过机体染色质上Ig基因转录程mRNA,转到核糖体上合成多肽链,其中重链和轻链分别在小核糖体和大核糖体上合成,合成后即可举行装配。123兽医
免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二、Ig代谢1.IgG半衰期为23d,IgA为5~6d,IgM为5d,IgE为2.4d;2.大多Ig分布于血管内外环境中,但IgM和IgD主要在血管内。3.B细胞受抗原刺激后增殖
分化中,最初几代的浆细胞只合成IgM;若有足够抗原刺激,才可合成IgG、IgA、IgD和IgE。4.就单个浆细胞而言,只能产生一种Ig,且只能形成含一种类型重链和轻链的Ig。124兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等
第五节Ig生物学活性一、与抗原特异性结合二、激活补体三、结合Fc受体四、通过胎盘五、抗体的免疫调节作用六、抗体的免疫原性125兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第六节五类Ig的特性与作用一、动物Ig
的特性与作用1.IgG是动物血清中含量最高的免疫球蛋白,为600~1600mg/100mL;分子量为160~180kD;是介导体液免疫的主要抗体,多以单体存在;是由脾脏和淋巴结中浆细胞产生;是唯一能通过人和兔胎盘的抗体;是动物抗感染免疫的主力抗体,也是疫苗免疫后监测的主要抗体;具有抗菌、抗
病毒、抗毒素、抗肿瘤等免疫学活性。126兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2.IgM是动物机体初次体液免疫反应中最早产生的免疫球蛋白,主要分布于血液中,含量为60~200mg/100mL;主要是由脾脏和淋巴结中B细胞产生;为五聚体,分子量为
900kD;具有抗菌、抗病毒、抗毒素、抗肿瘤等免疫学活性,活性比IgG高500~1000倍;可通过检测IgM抗体进行传染病的早期诊断;IgM可引起变态反应。127兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等
3.IgA以单体和二聚体两种形式存在;单体存在于血清中,称为血清型IgA,含量为200~500mg/100mL;二聚体主要存在于呼吸道、消化道外分泌液中,在初乳、唾液、泪液和脑脊液、羊水、腹水、胸膜液等中也有,称为分泌型IgA;它是由消化道、呼吸道等粘膜固有层中浆细胞产生;血清型IgA具有抗
菌、抗病毒、抗毒素等免疫学活性;分泌型IgA对机体呼吸道、消化道等局部粘膜免疫起着重要作用。128兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等4.IgE以单体分子形式存在,分子量为190kD;是由呼吸道和消化道粘膜固有层中的浆细胞产生;在血清中含量极微,0.02~0.05mg/100mL;是一种
亲细胞性抗体,易与皮肤组织细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细胞和血管内皮细胞结合。再结合抗原后,能引起这些细胞脱粒,释放活性介质,导致变态反应。5.IgDIgD在血清中含量极低,0.03~3mg/100mL,且极不稳定,容易降解;IgD分子量为170~200kD;
IgD是B细胞膜表面免疫球蛋白,与免疫记忆有关。129兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第七节人工制备抗体的种类一、多克隆抗体采用传统的免疫方法,将抗原物质经不同途径注入动物体内,经数次免疫后采取动物血液,分离
血清,所获得的抗体即为多克隆抗体。无论是细菌抗原,还是病毒抗原,均由多种抗原成分组成,因此进入机体后可激活多种淋巴细胞克隆,机体可产生针对各种抗原成分或抗原决定簇的抗体,由此获得的抗体实际是一种多克隆的混合抗体。130兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二、单克隆
抗体(monoclonalantibody,McAb)是指有一个B细胞分化增殖的自带细胞(浆细胞)产生的针对单一抗原决定簇的抗体。其制备过程:1.B细胞与骨髓瘤细胞的制备2.杂交瘤细胞的制备3.杂交瘤细胞的克隆化4.阳性克隆细胞的筛选5.阳性克隆
细胞的增殖6.注入小鼠及其腹水的收集7.单抗的纯化与保存131兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三、基因工程抗体(geneticengineeringantibody)是指按照人类设计要求,可增加或增加天然抗体的特异性和主要
生物学活性、去除或减少无关结构所重新组装的新型抗体分子。其制备过程:1.筛选抗体基因;2.修饰抗体基因;3.导入表达载体;4.真核或原核表达;5.抗体收获与纯化。132兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等1.抗体与免疫球蛋白的概念;2.
图解Ig单体的分子结构。3.IgFab片段和Fc片段的组成及其生物学活性;4.免疫球蛋白分子的特殊结构;5.Ig的种类;如何理解Ig分子的独特型?6.各类Ig的主要特性和免疫学功能;7.单克隆抗体的概念;其优点何在?133兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第五章非特异性免疫一、非特异性
免疫的概念非特异性免疫是机体在长期的种系发育与进化过程中逐渐建立起来的一系列防卫机能,对所有病原微生物都有防御作用,没有特殊的选择性。它受遗传控制,在个体一出生就具有。又称天然免疫(先天免疫)。非特异性免疫特异性免疫免疫类型134兽医免疫学抗
原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二、机体非特异性免疫的主要因素生理屏障作用非特异性细胞的吞噬作用非特异性免疫因素正常体液分子的非特异性免疫作用炎症反应机体组织的不感受性135兽医免疫学抗原抗体血清学
实验技术免疫检测技术等(一)生理屏障作用1、皮肤黏膜的体表屏障——第一道防线(1)机械阻挡作用:健康的皮肤黏膜、鼻毛、呼吸道和消化道定向运动的纤毛等,都能阻挡或排除微生物。(2)分泌抑菌杀菌物质:皮肤汗腺分泌的乳酸、皮脂腺分泌的不饱和脂肪酸、胃酸等都有杀菌作用。
136兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(3)正常菌群的拮抗作用:正常菌群一般情况下不致病,且对病原微生物有一定的拮抗作用,如口腔中唾液链球菌产生的过氧化氢,能抑制脑膜炎双球菌;肠道乳酸菌产生的细菌素和酸性物质,能抑制致病性大肠杆菌
和金黄色葡萄球菌等病原菌的生长;同时还可以刺激机体产生自然抗体,对一定病原菌有抑制作用。体表屏障对大多数病原微生物有一定的阻挡作用,但少数病原微生物如羊布氏杆菌和钩端螺旋体等,可突破此屏障,侵入机体引起感染。137兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术
等2、淋巴结的内部屏障——第二道防线病原微生物突破机体的防御屏障,进入机体后,它们将随着组织液及淋巴液到达淋巴结,淋巴结内的树突状细胞可将其捕获固定,继而被吞噬细胞吞噬消灭,阻止它们向组织深部扩散蔓延。138兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3、血脑血胎的深部屏
障——第三道防线(1)血脑屏障:由脑内的毛细血管壁及包于其外的神经胶质细胞构成,有阻止病原微生物和毒素等侵入脑组织的作用。(2)血胎屏障:是由母体子宫内膜的基蜕膜和胎儿绒毛膜组成。正常情况下,它不妨碍母子间的物质交换,但可阻止某些
药物、病原微生物、毒素等通过血胎屏障,进入胎儿体内,从而保证了胎儿在子宫内的正常发育。139兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等血脑屏障140兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(二)非特异性细胞的吞噬作用1、吞噬细
胞的种类(1)大吞噬细胞:包括游走及固定类型的巨噬细胞和血液及淋巴管中的单核细胞,即单核-巨噬细胞系统。(2)小吞噬细胞:即血液中的嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞。141兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2、吞噬过程当病原微生物或异物进入体内时,吞噬细胞受趋
化因子作用,向抗原处聚集,并通过吞噬或吞饮方式将病原微生物或异物摄入细胞内(对细菌等较大异物,直接伸出伪足将其吞入细胞内,形成吞噬体。对病毒等较小异物,则胞膜内陷,闭合形成吞饮小体)。吞噬体或吞饮小体向胞浆内的溶酶体靠近,形成吞噬溶酶体。溶酶体内的溶菌酶、过氧化氢酶等能直接杀死细菌,而水解蛋
白酶等将其进一步消化分解,最后将不能消化的残渣排出细胞外。142兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等143兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3、吞噬结果(1)完全吞噬:大多数细菌被吞噬细胞吞噬后,可被完全彻底的消化或杀灭。(2)不完全吞噬:一些病毒和兼性细胞内寄生菌(如结核杆
菌、布氏杆菌等),虽可被吞噬,但却不能被杀灭,称为不完全吞噬。这种吞噬对微生物起了一定的保护和扩散作用,从而降低了药物及体液杀菌因素的杀菌作用。144兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(三)正常体液因子的
非特异性免疫作用在健康动物的血液、组织液、淋巴液中,含有非特异性免疫作用的多种物质,如补体、溶菌酶、干扰素等。这些物质可直接或间接杀灭或裂解病原体,其作用无选择性。当它们与特异性抗体、吞噬细胞等其他防护因子配合时,能发挥较大的免疫防护作用。
145兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等1、补体系统补体是正常人和动物血清中含有的非特异性杀菌物质。是一组具有酶原活性的血清球蛋白,可被抗原抗体复合物或其他因素激活的酶系统,故称为补体系统。(1)组成和性质:约占血清球蛋白总量的10%,约有30种
蛋白质组成。性质不稳定,对温度敏感,56℃30min丧失活性。含量相对稳定。(2)补体系统的作用:参与非特异及特异性免疫反应,但在I、II型变态反应及自身免疫病中,也可损伤组织。146兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术
等2、溶菌酶广泛存在于分泌液、组织液及白细胞中,尤其是在乳汁、唾液及吞噬细胞溶酶体颗粒中含量较多。是一种低分子不耐热的碱性蛋白质,能水解G+细胞壁中黏肽的糖苷键,破坏细胞壁,水分进入,最后细菌崩解。G-细胞壁黏肽外面
还有一层脂多糖和脂蛋白,因而不受溶菌酶影响。目前已从新鲜鸡蛋清中提取,在医药上作为抗菌剂。147兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等溶菌酶作用148兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等
3、干扰素干扰素是由干扰素诱导剂作用于活细胞后,由细胞产生的一种低分子糖蛋白,能抑制多种病毒的生长和繁殖。干扰素的生物学活性(1)抑制病毒复制;抗病毒作用无特异性,是广谱抗病毒物质,,但其保护作用具有种属特异性。(2)抑制癌细胞分裂。(3)活化单核巨噬细胞。149兽医免疫学抗原
抗体血清学实验技术免疫检测技术等(四)炎症反应当病原微生物侵入机体皮下或黏膜下层时,局部经常出现炎症反应。炎症过程能减缓和阻止病原微生物向机体其他部位的扩散。因为各种类型的吞噬细胞向炎症部位聚集,使体液防御因素大量聚积
,其他组织细胞死亡崩解后,释放出各种白细胞素、吞噬素、溶菌酶等,所有这些物质,对机体抵御传染都是有益的。150兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(五)机体组织的不感受性指某些机体组织生来就对病原微
生物或其毒性产物缺乏感受性,这种不感受性并非因为病原微生物在机体内丧失了致病力,也不是由于抗体和吞噬细胞的作用造成的,而是动物组织对该种病原微生物或其毒性产物没有反应的缘故。如给龟皮下注射破伤风毒素后,不发生任何症状,但经过几个月后,取其血液注射入小白鼠体内,可使小
白鼠发生破伤风而死亡。151兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三、影响非特异性免疫因素1、遗传因素:动物种属差异2、年龄因素:小鹅瘟、IBD、仔猪黄白痢等3、环境及应激因素:气候、温度、湿度和创伤等.152兽医免疫学抗原抗
体血清学实验技术免疫检测技术等1.非特异性免疫的概念2.机体非特异性免疫的因素3.影响非特异性免疫的因素153兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第六章特异性免疫应答第一节概述第二节免疫应答的一般规律第三节B细胞介导
的体液免疫第四节T细胞介导的细胞免疫第五节免疫耐受第六节免疫调节154兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第一节概述一、免疫应答的概念免疫应答(immuneresponse,Ir),是指机体受到抗原刺激后,体内特异性淋巴细胞对抗原分子的识别、活化、增殖、分化或失去活性潜能,并表现出
一定生物学校应的过程,包括:(1)递呈细胞(巨噬细胞等)对抗原的处理、加工和递呈;(2)特异性淋巴细胞(T/B淋巴细胞)对抗原的识别、活化、增殖、分化,并产生免疫效应分子(抗体与细胞因子等)及免疫效应细胞(细胞毒性T淋巴细胞和迟发型变态反应性T细胞等);(3)对抗原物质和再次进
入机体的抗原物质产生清除效应。155兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二、免疫应答的特点1.参与细胞:T/B淋巴细胞----参与免疫应答的核心细胞巨噬细胞等----参与免疫应答的辅佐细胞2.表现形式:B细胞介导的体液免疫应答T细胞介导的细胞免疫应
答3.基本特征:特异性----针对某种抗原产生的抗体/效应细胞具有一定免疫期----这与抗原性质、免疫次数和机体反应性等有关具有免疫记忆----初次接触某抗原后,机体可保留对该抗原的“记忆性”156兽医免疫学抗
原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三、免疫应答的类型由于抗原的质量/数量、机体免疫状态/反应性的不同,机体对抗原物质产生的免疫应答类型不同。生理性应答(免疫保护)免疫应答的类型对非己抗原产生正应答,以免遭受外源抗原的侵害(免疫保护)病理性应答(免疫损伤)对
自身抗原产生负应答,以保护自身组织不受损伤(免疫耐受)对非己抗原过高应答,引起变态反应对非己抗原低应答或负应答,导致感染扩散或肿瘤发生对自身抗原过正应答,引起自身免疫反应或自身免疫性疾病157兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术
免疫检测技术等第二节免疫应答的一般规律一、免疫应答的场所抗原递呈细胞(APC)和淋巴细胞的协作,是特异性免疫应答的物质基础。外周淋巴器官主要是淋巴结和脾脏,是机体免疫应答的主要场所。皮肤→淋巴循环→淋巴结抗原→静脉→脾口服或吸入→粘膜局部→粘膜下淋巴细胞小胶质细胞→脑158兽医免疫学抗原
抗体血清学实验技术免疫检测技术等二、免疫应答的基本过程免疫应答(immuneresponse,Ir)是一个相当复杂的过程,有多种免疫细胞和免疫分子的参与,并在遗传基因的调控下进行,它包括B细胞介导的体液免疫应答和T细胞介导的细胞免疫应答。便于理解,一般将免疫应答的发生
过程认为地分为三个阶段:致敏阶段反应阶段效应阶段这三阶段紧密相联不可分割,且目前还有很多环节尚未清楚。159兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(一)致敏阶段又称感应阶段,是抗原物质进入体内,抗原递呈细胞对其识别、捕获、加工处理和提呈,以及抗原特异性淋巴细胞(T、B细胞)对抗原的识别
阶段。1.抗原在体内的分布与定位抗原是启动免疫应答的物质,没有抗原就没有免疫应答。无论以何种途径进入体内的抗原,均由淋巴管和血管运送到全身各处,其中绝大部分被吞噬细胞分解清除,只有少部分存留在淋巴组织中诱导免疫应答。抗原主要局限在脾脏和淋巴结上,主要
存留在淋巴结的髓质和淋巴滤泡,以及脾脏的边缘区和淋巴滤泡上。这些抗原物质拘留在淋巴组织,为免疫细胞捕获和产生免疫应答提供了必要的前提。160兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2.免疫辅助细胞(APC)对抗原的摄取、处理与提呈(1)APC的分布主要包括分布在全身组织中的巨噬细胞、脾
脏和淋巴结中树突状细胞、并指装细胞和皮肤组织中的郎罕氏细胞。另外,活化的B细胞也具有抗原提呈作用。(2)APC对抗原的摄取、处理与提呈APC对抗原无特异性识别能力,其摄取方式是:随机捕获接触到的抗原,也可通过胞膜上受体(Fc受体、C3b受体等)捕获
抗原并摄入细胞内。在细胞内,抗原物质被溶酶体或蛋白酶降解成肽段并暴露出抗原决定簇,然后被高尔基体运送到细胞表面,供CD4+或CD8+T细胞的TCR识别。161兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等162兽医免疫
学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等163兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3.抗原特异性淋巴细胞对抗原的识别T淋巴细胞借助其表面TCR识别抗原多肽-MHCII分子;B淋巴细胞借助其表面SmIg识别TI抗原和TD
抗原。(二)反应阶段又称增殖与分化阶段,此阶段是抗原特异性淋巴细胞识别抗原后活化,进行增殖与分化,以及产生效应性淋巴细胞和效应分子的过程。T淋巴细胞增殖分化为淋巴母细胞,最终成为效应性淋巴细胞,并产生多种细胞因子;B细胞增殖分化为
浆细胞,合成并分泌抗体。一部分T、B细胞淋巴细胞在分化的过程中变为记忆性细胞(Tm和Bm)。这个阶段有多种细胞间的协作和多种细胞因子的参加。164兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等165兽医免疫学抗原抗体
血清学实验技术免疫检测技术等166兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(三)效应阶段此阶段是由活化的效应性细胞CTL(细胞毒性T细胞)与TD(迟发型变态反应性T细胞)细胞和效应分子(抗体与细胞因子)发挥细胞免疫效应和体液免疫
效应的过程,这些效应细胞和效应分子共同作用清除抗原物质。这些效应过程将在体液免疫和细胞免疫中讲述。167兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等168兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第三节B细胞介导的体液免疫由B细胞介导的免疫应答称为体液免疫(humoralimmuno-res
ponse,HI),而体液免疫效应是由B细胞通过对抗原的识别、活化、增殖,最后分化成浆细胞并分泌抗体来实现的。HI可由TI抗原或TD抗原诱发,除了上述三个阶段外,还具有自身的特点。169兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术
等一、体液免疫应答的类型及特点体液免疫应答的类型与抗原类型有关。1.TI抗原引起的体液免疫应答不需要Th细胞的辅助,常也不需要巨噬细胞的参与;只产生IgM型抗体,无免疫记忆。2.TD抗原引起的体液免疫应
答需要巨噬细胞和T细胞的协作;先产生IgM,继而产生IgG和其它类型Ig;初次刺激后可诱导记忆性B细胞形成,相同抗原再次刺激后可出现记忆应答。170兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等171兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二、抗体产生的一般规律1.初次应答动物机体
初次接触抗原,也就是某种抗原首次进入体内引起的抗体产生过程称为初次应答。初次应答有以下几个特点:A.具有潜伏期:机体初次接触抗原后,在一定时期内体内查不到抗体或抗体产生很少,这一时期称为潜伏期。B.先IgM后IgG:初次
应答最早产生的抗体为IgM,可在几天内达到高峰,然后开始下降;接着才产生IgG,即IgG抗体产生的潜伏期比IgM长。C.总量低维持短:初次应答产生的抗体总量较低,维持时间也较短。其中IgM的维持时间最短
,IgG可在较长时间内维持较高水平,其含量也比IgM高。172兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2.再次应答动物机体第二次接触相同抗原时体内产生的抗体过程称为再次应答。再次应答有以下几个特点:A.潜伏期缩短:机体再次接触与
第一次相同的抗原时,起初原有抗体水平略有降低,接着抗体水平很快上升(约2-3d)。B.总量高维持长:可产生高水平的抗体,可比初次应答多几倍到几十倍,而且维持很长时间。C.多为IgG少是IgM:再次应答产生的抗体大部分为IgG,而IgM很少,如果再次应答间隔的时
间越长,产生的IgM越少。173兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3.回忆应答抗原刺激机体产生的抗体经一定时间后,在体内逐渐消失,此时若机体再次接触相同的抗原物质,可使已消失的抗体快速回升,这称为抗体的回忆应答。再次应答和回忆应答取决于体内记忆性T细胞
和B细胞的存在。记忆性T细胞可很快增殖分化成Th细胞,对B细胞的增殖和产生抗体起辅助作用;记忆性B细胞与抗原再次接触时,活化,增殖分化成产生抗体。174兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等175兽医免疫学
抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等4、Ig类转换Ig类转换(同种型转换,isotypeswitch)是指B细胞在受抗原刺激后,首先合成IgM,然后转为合成IgG等类型的抗体。176兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等177兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三、抗体介
导的免疫效应:抗体在体内可发挥多种免疫功能:1.中和作用:针对细菌毒素和针对病毒的抗体,可对相应的毒素和病毒产生中和效应。2.免疫溶解作用:某些细菌和原虫与相应抗体结合后,在补体的参与下,可导致菌体或虫体溶解。3.免疫调理作用:抗原与相应的抗体结合
后,则容易受到单核/巨噬细胞的吞噬。4.局部黏膜免疫作用:178兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等179兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等5.抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC):一些淋巴细胞
(如K、NK、巨噬细胞等),其表面有Fc受体,当抗体与相应的靶细胞(如肿瘤细胞)结合后,效应细胞发挥其细胞毒作用,将靶细胞杀伤。6.对病原微生物生长的抑制作用:如霉形体和钩端螺旋体,其抗体与之结合后可表现出生长抑制作用。7.引起免疫损伤:抗体在体内引起的免疫损伤主要是介导I型(1gG)、Ⅱ型和Ⅲ
型(IgG和IgM)变态反应,以及一些自身免疫疾病。180兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三、影响抗体产生的因素1.机体方面(1)遗传——受MHC-Ⅰ、Ⅱ基因控制(2)年龄——与免疫系统发育、成熟有关胚胎期——易形成免疫耐受幼龄期——免疫系统发育未成熟,易受母源抗体影响
成年期——最好,但也受上次免疫Ab的影响老年期——差,易产生自身免疫病、肿瘤(3)营养严重缺蛋白、VitA、VitC、Fe、Zn、Sn等,免疫器官发育不良或退化;应激(冷热、噪音、惊吓、迁群、长途运输或饥渴)可
使肾上腺素上升,导致免疫功能降低;长期患病、病毒感染、使用免疫抑制剂等也可使免疫功能下降。181兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2.抗原方面(1)抗原性质亲缘远:灭活苗,B细胞,体液免疫亲缘近:内源性Ag,T细胞,细胞免疫(2)抗原物理状态可溶性Ag(血清蛋白、类毒素
):Ab产生周期期长(2-3周)颗粒性Ag:周期短(3-5天)加佐剂Ag:周期短,一次注射可产生多次再次应答(3)抗原用量、接种次数与时间间隔(4)接种途径182兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第四节T细胞介导的细胞免疫细胞介导的免疫应答(cell
-mediatedimmunoresponse,CMI)或细胞免疫应答(cellularimmunoresponse,CI),包括吞噬细胞的吞噬作用、K细胞/NK细胞介导的细胞毒作用和T细胞介导的特异性细胞免疫,但目前所指的细胞免疫主
要是指由T细胞介导的细胞免疫。诱导特异性细胞免疫的抗原仅限于TD抗原。参与的细胞有:APC、免疫调节细胞(Th和Ts)和效应细胞(TDTH和Tc)。细胞免疫效应有两种形式:(1)由迟发型变态反应T细胞(TDTH)释放细胞因子,引起以单核细胞
浸润为主的炎症反应;(2)CTL介导的特异性细胞毒作用。183兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等184兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等一、CTL介导的特异性免疫机制杀伤表达同MHC
I类分子结合的特异性抗原的靶细胞。1.靶细胞特点(1)病原体在感染细胞内增殖:1)不被所感染的细胞破坏;2)不能接触细胞外的抗体。(2)MHCI类分子表达下降。2.CTL杀伤靶细胞机制见下图。185兽医免疫学抗原抗体
血清学实验技术免疫检测技术等186兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等187兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二、Th1细胞介导的特异性免疫机制主要免疫效应功能活化巨噬细胞介导迟发型超敏反应诱导活化B细胞产生调理性抗体(一)诱导
巨噬细胞活化的作用1.分泌IL-3和GM-CSF:刺激骨髓内新单核细胞的产生;2.分泌TNF-和TNF-:扩张血管和改变血管内皮细胞粘附分子的表达,分泌MCP-1→吸引聚集巨噬细胞。188兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(二)导致炎症反应——介导迟发型变态反应(即IV型
变态反应)1.迟发型变态反应概念效应T细胞同特异性抗原作用后,引起的以单个核细胞浸润和组织损伤为主要特征的炎症反应。2.特点(1)参与的效应T细胞:CD4Th1和CTL细胞;(2)以单个核细胞浸润为主要的炎症反应;(3)发生较慢,常需24~72小时;(4)无抗体和补体参与。1
89兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等190兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(三)辅助B细胞产生调理抗体CD4+Th1细胞→IFN-和IL-2→B细胞→调理性抗体(IgG1和IgG3亚类)+靶细胞→结合CR或FcR(吞噬细胞和NK细胞)
→破坏、清除靶抗原。191兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等192兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三、T细胞介导的细胞免疫效应1.抗感染作用主要针对细胞内感染的病原体,包括:(1)抗细菌感染,如结核杆菌、沙门氏菌感染等;(2)抗病毒感染(所以
病毒)(3)抗真菌感染,如白色念珠菌、隐球菌等;(4)抗寄生虫感染,如原虫感染等。2.抗肿瘤作用包括:(1)Tc细胞的特异性杀伤肿瘤;(2)巨噬细胞/K细胞/NK细胞的ADCC杀伤肿瘤;(3)淋巴因子(如LT)溶瘤。3.免疫损伤作用包括:(
1)Ⅳ型变态反应;(2)急性移植排斥反应;(3)某些自身免疫性疾病等。193兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第五节免疫耐受一.免疫耐受的概念免疫耐受(immunetolerance),是机体免疫系统在接触某种抗原后产生的特异性免疫无反应状态,或称为
负免疫应答,表现在当再次接触同一抗原时不发生可查反应,但对其他抗原的免疫应答仍正常存在。194兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二.免疫耐受的一般特性1.免疫耐受是由抗原特异的T和/或B细胞被排斥、灭活或抑制所致;2.未成熟淋巴细胞较成熟淋巴细胞更容易
诱导免疫耐受;3.机体耐受性的维持需要耐受原的存在,并与未成熟淋巴细胞相互作用;4.某种条件下成熟淋巴细胞也可被诱导产生耐受性。195兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三.免疫耐受产生的条件(一)抗原方面1.抗原理化性状:一
般而言,小分子、可溶性的非聚合单体物质常为耐受原;2.抗原剂量:一般抗原量越大或动物年龄越小,越容易诱导产生免疫耐受;3.抗原注射途径:静脉注射最易诱导免疫耐受,而皮下和肌肉注射最难产生耐受性;4.有无免疫佐剂:不加免疫佐剂的抗原较易诱生免疫耐受(二)机体方
面1.机体发育程度或年龄:胚胎期最易诱导耐受性2.动物品种或品系:鼠在胚胎期或新生期都易诱导耐受,而兔、有蹄类和灵长类只在胚胎期较易诱生耐受性。3.免疫抑制措施的影响:抗免疫细胞等生物制品、环磷酰胺等免疫抑制剂等的使用可诱
生耐受。196兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等四.研究免疫耐受的意义在免疫理论上,可以解释动物机体为何能够识别“自己”和“非己”,这是免疫学理论的核心问题。在医学实践上,抗原通过免疫耐受的诱导或终止来防治某些疾病,如自身免疫性疾病、器官移植排斥反
应、肿瘤性疾病等。197兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第六节免疫调节一.免疫调节的概念免疫调节(immuneregulation),是指在免疫应答过程中,各种免疫细胞及免疫分子之间相互促进和
抑制,并在遗传基因的控制下完成免疫系统对抗原物质的识别与应答。根据参与免疫调节因素的不同,可将免疫调节分为两大类,即内调节和外调节。198兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二.免疫内调节免疫内调节,是指免疫系统内部各种免疫因素之间的相互调节,包括:免疫分子:抗原、细胞因
子、抗体、免疫复合物、补体活性片段及独特型网络免疫细胞:T/B细胞、巨噬细胞、NK细胞免疫基因:Ir基因、Is基因199兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三.免疫外调节免疫系统是一个极为复杂的系统,在维持机体的稳态和健康
方面起着重要的作用。免疫系统受到神经系统和内分泌系统的调控,同时免疫系统对神经系统和内分泌系统也能施加调节性影响。神经免疫调节已成为当今生物医学科学中发展最迅速的研究领域之一。200兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等1.免疫应答的概念、特点与类型。2.免疫应答的一般过程。3
.抗体产生的一般规律。4.B细胞介导体液免疫的效应。5.T细胞介导体液免疫的效应。6.免疫耐受的概念、特点及产生条件。7.免疫调节的内涵。201兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第七章变态反应一、概述二、Ⅰ型变态反应三、Ⅱ型变态反应四、Ⅲ型变态反应五、Ⅳ型变态反应202兽医
免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等一、概述1.变态反应的概念变态反应(allergy),又称为过敏反应(anaphyaxis)或超敏反应(hypersensitiveityreaction),是动物机体
免疫系统受到再次进入机体的同一抗原刺激而产生的一种过于强烈或不适当免疫应答、导致机体组织器官损伤的异常或病理性免疫反应。参与变态反应的抗原称为变应原,变应原有完全变应原和不完全变应原。完全变应原:如异种血清、蛋白质、花粉、微生物、寄生虫等不完全变应原:如药物、青霉素
等203兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2.变态反应的发生过程(1)致敏阶段:变应原初次进入机体初次免疫应答,产生免疫物质(Ab或TDTH)机体致敏状态(2)发敏阶段:变应原再次进入机体作用到Ab或
TDTH发生症状3.变态反应的类型根据变态反应发生的机理和临床特点,可分为4个类型:Ⅰ型变态反应(过敏反应)Ⅱ型变态反应(细胞溶解型或细胞毒型)Ⅲ型变态反应(免疫复合物型或血管炎型)Ⅳ型变态反应(迟发型超敏反
应)204兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二、Ⅰ型变态反应也称为过敏反应或速发型变态反应(immediateallergy),是最常见的一种变态反应,它具有明显的个体差异和遗传倾向。(一)Ⅰ型变态反应的发病机制1.过敏原包括呼吸道(屋尘、花粉、真菌、
人及动物皮屑、羽毛)、消化道(鱼、虾、肉、蛋、牛奶等食物)、皮肤(昆虫与寄生虫的毒素及化学物质)以及静脉肌肉注射的化学药物(如青霉素)等。2.参与抗体主要是IgE,由鼻腔、扁桃体、支气管、胃肠粘膜等固有层浆细胞产生。2
05兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3.参与的免疫细胞主要有肥大细胞和嗜碱性粒细胞。4.参与介质包括组氨、激肽释放酶(Bradykinin)、嗜酸性粒细胞趋化因子(ECF-A)、白三烯(LT)、前列腺素(PG)、血小板趋化因子
(PAF)、白细胞介素(IL)等。下面主要介绍组胺的生物活性。组胺:存在于肥大细胞和嗜碱性粒细胞颗粒中,以呼吸道、消化道和皮肤含量较高,通常呈无活性状态,在一定条件下可通过与颗粒外Na+交换而释放出来。组胺生物学活性:①使小静脉和毛细血管扩张,通透性增加;②刺激支气管、子
宫和膀胱等处平滑肌收缩;③促进腺体分泌增多。若作用于体表局部,可使皮肤和粘膜充血、水肿或出现荨麻疹;作用于鼻咽、支气管,可引起鼻塞、流涕和支气管哮喘;作用于胃肠道,可引起恶心、呕吐、胃酸分泌、腹痛、腹泻等。206兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等
5.Ⅰ型变态反应的发生机制(1)致敏阶段抗原→机体→产生IgE→结合于肥大细胞和嗜碱性粒细胞;(2)发敏阶段:A.细胞活化释放生物活性介质B.释放的生物活性介质及其作用一个抗原分子与两个IgE结合使抗体交联,激活嗜碱粒细胞和肥大细胞,使细胞脱颗粒,释放出各
种具有生物活性的物质,如组织胺、五羟色胺、缓激肽等,产生各种生物效应。207兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等208兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(二)常见的Ⅰ型变态反应性疾
病1.过敏性休克常因注射抗生素(如青霉素、先锋霉素等)或治疗血清等因素引起,表现为烦躁不安、气急胸闷、恶心呕吐、腹泻腹痛乃至意识障碍、昏迷抽搐等。2.皮肤过敏反应可由药物、食物、羽毛、花粉、油漆和肠道寄生虫等引起,主要表现为皮肤荨麻疹、湿疹和血管性水肿。3.消化
道过敏反应可由摄入鱼、虾、蟹、蛋、奶等食物或服用某些药物后导致,主要表现为恶心、呕吐、腹泻、腹痛等。4.呼吸道过敏反应可因吸入植物花粉、细菌、动物皮毛和屋尘等抗原物质引起,主要表现为支气管哮喘和过敏性鼻炎。209兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(
三)Ⅰ型变态反应的防治原则1.检出过敏原,避免与之接触2.脱敏疗法或减敏疗法:小剂量多次注射3.阻止生物活性介质释放:使用色甘酸二钠、肾上腺糖皮质激素、肾上腺素、前列腺素、氨茶碱等。4.使用生物活性介质拮抗药物:如扑尔敏、异丙嗪、乙酰水杨酸、苯塞啶等。5.改变效应器官反应性:
使用肾上腺素、麻黄素及葡萄糖酸钙、维生素C等。210兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三、Ⅱ型变态反应又称为细胞毒性变态反应(cytotoxictypeallergy),其发生机制是细胞上的抗原与相应抗体结合,激活补体导致
细胞溶解。(一)Ⅱ型变态反应的发病机制1.引起抗原(1)机体细胞表面固有的抗原成分,如ABO血型抗原、Rh抗原;(2)吸附在组织细胞上的外来抗原或半抗原,如病原体、化学药物等;(3)异嗜性抗原,如链球菌与人肾小球基底膜、心肌瓣膜之间的共同抗原。2.参与
抗体主要是IgG和IgM,也有IgA。211兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3.Ⅱ型变态反应的发生机制212兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(二)常见Ⅱ型变态反应疾病1.由同种异性抗原引起(1)输血反应(2)
新生儿溶血病2.由外来抗原或半抗原引起(1)溶血性贫血(2)粒细胞减少症(3)血小板减少性紫癜3.由自身抗原引起(1)自身免疫性溶血性贫血(2)链球菌感染后肾小球肾炎4.由共同抗原引起(1)肾小球肾炎:(2)肺-肾综合征:5.由免疫系统或免疫细胞异常引起,如特发性血小板减少性紫癜、自身免疫性溶
血性贫血6.刺激型,如状腺功能亢进病213兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等四、Ⅲ型变态反应又称为免疫复合物型变态反应(immunecomplextypeallergy),其主要特点是游离抗原与相应抗体结合形成免疫复合物(IC),若IC不能及时被机体清除,则可在局部沉积,通过激
活补体,并在血小板、中性粒细胞及其他细胞参与下,引起一系列反应而导致组织损伤。(一)Ⅲ型变态反应的发病机制1.引起抗原①内源性抗原:如肿瘤抗原、全身性红斑狼疮患者核抗原等②外源性抗原:如病原微生物、寄生虫、药物、异种抗原等2.参与抗体主要是IgG和IgM。214兽医免疫学抗
原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3.Ⅲ型变态反应发生机制(1)免疫复合物的形成①抗原的持续存在:是形成IC的先决条件②抗原抗体的比例:抗原稍微过剩③抗原的性状:主要是可溶性抗原④抗体的性质:抗体的亲和力等(2)IC的沉积①血管壁通透性增高:②IC的
数量:③IC的性质与大小:(3)发生机制215兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等216兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等217兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(二)常见免疫复合物性疾病1.局部免疫复合物病如
:实验性局部变态反应(Athus反应)人类局部过敏反应2.急性全身性免疫复合物病如:血清病链球菌感染后肾小球肾炎毛细支气管炎3.慢性免疫复合物病如:全身性红斑狼疮类风湿关节炎4.过敏性休克218兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等219兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等五、
Ⅳ型变态反应又称为迟发性变态反应(delayedallergy),其发生机制与抗体和补体无关,主要是T细胞介导的免疫损伤。Ⅳ型变态反应是由致敏T细胞与相应抗原结合而引起的,以单核细胞浸润和细胞变形坏死为特征的局部变态反应性炎症。一般在再次接触抗原后48~72h
发生,这可能是由于:①体内致敏淋巴细胞再次与相应抗体时,产生淋巴因子需要一定时间;②足够多的单核细胞聚集于炎症区域也需要一定时间。220兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(一)Ⅳ型变态反应发病机制1.引发
抗原微生物、寄生虫、组织抗原或某些化学物质等。2.参与细胞主要是T细胞3.发生过程(1)T细胞致敏阶段:外来抗原进入机体,刺激T细胞分化增殖形成致敏淋巴细胞(2)致敏T细胞的效应阶段①释放淋巴因子②巨噬细
胞活化和释放溶酶体酶③CTL效应221兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等抗原机体致敏T细胞致敏TC细胞直接杀伤靶细胞致敏TD细胞释放淋巴因子单核细胞浸润单核细胞激活释放溶酶体酶组织细胞变性坏死Ⅳ型变态反应的发生机制初次再次222兽医免疫学抗原抗体血清学实
验技术免疫检测技术等IV型变态反应包括传染性变态反应、接触性皮炎和某些节肢动物所引起的变态反应。(二)常见的Ⅳ型变态反应性疾病传染性变态反应是某些细胞内寄生病原菌如布氏杆菌、结核杆菌等引起。患病动物机体受病原菌所致敏,对其相应的变应原具有异常高的反应性。如用该种病原
菌裂解后的抽提液给患病动物皮下接种或滴眼,可引起局部炎症等变态反应。在兽医诊断中如检疫牛群中是否感染了结核病,即用结核菌素(OT)给牛体皮内注射或滴眼,观察局部是否发生炎症反应。223兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等变态反应的特点:1.四型变态反应的发生比较快,可由抗
体介导,并通过血清中的抗体被动转移给正常动物。I型须有肥大细胞、嗜碱细胞和IgE的参与;Ⅱ型须有靶细胞表面抗原结合的IgG、IgM参与;Ⅲ型须有IgG或IgM与抗原形成一定大小的免疫复合物,且沉积之后致病;Ⅳ型是由T细
胞介导。2.补体参与Ⅱ型、Ⅲ型变态反应,但必须依赖补体才能致病的只有Ⅲ型变态反应。3.同一变应原在不同个体或同一个体可引起不同型变态反应。4.在同一个体可能同时存在两种或两种以上的变态反应。5.有时同一疾病也可由不同型变态反应参与。224兽医免疫学
抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等1.变态反应的概念与类型。2.I型变态反应的发生机制与常见疾病。3.Ⅱ型变态反应的发生机制与常见疾病。4.Ⅲ型变态反应的发生机制与常见疾病。5.Ⅳ型变态反应的发生机制与常见疾病。225兽医免疫学抗原抗体血清学实验
技术免疫检测技术等第八章免疫学实验技术免疫学实验技术是指利用免疫反应特异性的原理,建立的各种检测与分析以及建立这些技术的各种制备方法。包括:(1)免疫血清学技术如沉淀试验等;(2)细胞免疫学技术如免疫细胞功能鉴定等;(3)免疫学制备技术如高免血清制备等
。226兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第一节免疫血清学技术一、免疫血清学技术的类型(1)凝聚性反应:凝集试验和沉淀试验(2)标记抗体技术:荧光抗体技术、酶标抗体技术、放射性同位素标记抗体技术、发光标记抗体技术等(3)有补体参与
的反应:如补体结合反应(4)中和反应:如病毒中和试验、毒素中和试验(5)免疫复合物散射技术:如激光散射免疫技术(6)电免疫反应:如免疫传感器技术(7)免疫转印技术:如WesternBlotting抗原与
相应抗体在体内和体外均能发生特异性结合,因抗体主要来自血清,因此在体外进行的抗原抗体反应称为血清学反应或免疫血清学技术。227兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等1.特异性与交叉性具有高度特异性•Theabilityofanindividualantibodycombin
ingsitetoreactwithonlyoneantigenicdeterminant.•Theabilityofapopulationofantibodymoleculestoreactwithonlyoneantigen.若存在共同抗原,则发生交叉反应。•Theabil
ityofanindividualAbcombiningsitetoreactwithmorethanoneantigenicdeterminant.•TheabilityofapopulationofAbmoleculesto
reactwithmorethanoneAg二、免疫血清学反应的一般特点228兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2.抗原抗体结合机理(1)可逆性,分子表面结合(2)比例适当(3)存在二阶段性,即结合阶段和可见阶
段AbAgHighAffinityAbAgLowAffinityAgexcessEquivalence–LatticeformationAbexcess3.免疫血清学反应的影响因素(1)电解质(2)温度(3)酸碱度(4)振荡(5)杂质229兽医免疫学抗原抗体血
清学实验技术免疫检测技术等三、凝聚性试验抗原与相应抗体结合形成免疫复合物,在电解质存在下,免疫复合物相互凝聚形成肉眼可见的凝集小块或沉淀物,以此判定是否存在相应的抗体或抗原,称为凝聚性试验。根据参与反应的抗原性质不同,可分为两大类:(1)凝集试验(agglutinationtest)主
要是颗粒性抗原参与(2)沉淀试验(precipitationtest)主要是可溶性抗原参与230兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(一)凝集反应当颗粒性抗原与其相应抗血清混合时,在一定浓度的电解质环境中,抗原凝集成大小不等的凝集块,叫凝集反应。凝集反应广泛地应用
于疾病的诊断和各种抗原性质的分析。即可用已知免疫血清来检查未知抗原,亦可用已知抗原检测特异性抗体。凝集试验的种类(1)直接凝集试验:颗粒性抗原(2)间接凝集试验:可溶性抗原(3)病毒的血凝与血凝抑制试验(4)乳胶凝集试验23
1兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等1、直接凝集试验颗粒抗原与抗体直接结合出现凝集现象叫直接凝集反应。(1)玻片凝集反应1.取清洁玻片一张,用接种环分别取诊断血清、诊断血清和生理盐水于玻片三个位置上。2.
无菌用接种环取待检细菌培养物少许,分别混合于其中第一点诊断血清和生理盐水上。3.同法取对照细菌培养物少许,于第二点诊断血清混匀。4.轻轻摇动玻片,经1-2分钟后肉眼观察,出现乳白色凝集块,即为阳性反应;仍为均匀的乳浊液,即为阴性反应。232兽医免疫学抗原抗
体血清学实验技术免疫检测技术等(2)试管凝集反应为一种定量试验,用已知抗原检查血清中有无特异抗体,并测定其相对含量。1.取7只洁净小试管于管架,分别加0.5mL生理盐水。2.在第1管中加1:10稀释血清0.5mL,混
合后吸出0.5mL毫升于第2管,同样混匀后吸出0.5mL于第3管。依次类推,稀释到第6管,吸0.5mL弃去。第7管不加血清作为对照;3.用移液管吸取待检抗原,分别加每管0.5mL;4.同法于第2排各管中加入伤寒O菌液0.5mL。5.将各管振荡混匀,放37℃水浴
箱中2—4小时或37℃孵育箱中过夜次日取出观察结果。233兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2、间接凝集反应将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关的颗粒载体上,然后与相应的抗体结合,也可出现颗粒载体的凝集现象,称
为间接凝集反应。间接凝集反应比直接凝集反应敏感性为高,可用于微量抗体或抗原的检查。间接血凝试验的分类:(1)正向间接凝集试验(2)反向间接凝集试验(3)间接凝集抑制试验234兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(1)间接血球凝集试验(间接血凝试验)间接血球凝集试验是根据
红血球表面的吸附作用而建立起来的。将细菌可溶性抗原提出使之吸附于红血球表面,此时红血球即称为“致敏红血球”。这种致敏的红血球具有细菌的抗原性,与相应的抗血清相遇可产生凝集现象。间接血凝抗原的制备可用加碱
或加热的方法使菌体中的多糖物质浸出,去除类脂以免干扰红血球的吸附作用。但如系蛋白质时则用来吸附的红血球需先用鞣酸予以处理。235兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等1/21/41/81/161/321/641/1281/2561/5121/102
4Pos.Neg.Titer648512<232128324Patient12345678间接血凝试验236兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等间接血凝抑制试验+PriortoTest++TestPat
ient’ssample237兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等可溶性抗原与相应抗体混合,在电解质存在下,两者比例适合,即可有沉淀物出现,叫沉淀反应(Precipitation)。由于沉淀反应抗原多系胶体溶液。沉淀物主要是由抗体蛋白所组成。为了求得抗原与抗体的适宜比例,保证有足够
的抗体,而且抗原分子小,具有较大的反应面积,因此操作上通常是稀释抗原,不稀释抗体。沉淀反应的种类有环状沉淀试验、絮状沉淀试验、琼脂扩散试验及免疫电泳试验等。(二)沉淀试验238兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等沉淀反应试验的类型(1)液相沉淀试验如
絮状沉淀试验、环状沉淀试验等(2)凝胶扩散试验如琼脂扩散试验(3)免疫电泳试验如免疫电泳、对流免疫电泳、火箭免疫电泳等239兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等1、环状沉淀反应当抗原与相应抗体形
成接触面时,如二者比例适当,接触面上可形成一个乳白色的环状物即为阳性沉淀反应。阳性对照阴性对照待检样本血清抗原240兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2、琼脂扩散试验琼脂扩散是抗原抗体在凝胶中所呈现的一种沉淀反应。抗体在含有电解质的琼脂凝胶中与抗原相遇时,便出现可见的白色沉淀线。
这种沉淀线是一组抗原抗体的特异性复合物。如果凝胶中有多种不同抗原抗体存在时,便依各自扩散速度的差异,在适当部位形成独立的沉淀线。因此,琼脂扩散试验广泛地用于抗原成分的分析。241兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等琼脂扩散试验结果双扩散试验结果示意图A:已知抗体a、b:阳性对照;
c、d、e、f:被检材料242兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等抗原特异性与沉淀线形状的关系a、b为抗体;A、A’、B为抗原;A、B完全不同;A、A’部分相同243兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(1)免疫电泳试验免疫电泳实验是先将抗原物质在琼脂凝胶中做电泳分离,
然后于凝胶槽中加入抗体血清。使抗原抗体进行双向扩散,在比例适宜部位形成特异的抗原抗体沉淀弧线。每条沉淀弧线代表一组抗原抗体复合物,故可用抗原成分分析;且可以根据其迁移率与抗体所出现的特异反应进行鉴定。3、免疫电泳技术244兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(2)对流免
疫电泳试验对流免疫电泳是在琼脂扩散基础上结合电泳技术而建立的一种简便而快速的方法。此方法能在短时间内出现结果,故可用于快速诊断,敏感性比琼脂扩散试验高10-15倍。抗体分子在PH8.6条件下只带微弱的负
电荷,且其分子量较大,在电场中游动慢。琼脂是一种酸性物质,在碱性缓冲液中进行电泳,它带有负电荷,而与琼脂相接触的水溶液就带正电荷,这样的液体便向负极移动。抗体分子就是随着带正电荷的液体向负极移动的。而一般的蛋白质(如血清抗原)也受
电渗作用的影响,使泳动速度减慢,但它的电泳迁移率远远大于电渗作用。这样抗原抗体就达到了定向对流,在两者相遇且比例合适时便形成肉眼可见的沉淀线。245兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等对流免疫电泳抗原孔、抗体孔位置示意图246兽医免疫学抗原抗体血清
学实验技术免疫检测技术等(3)火箭电泳试验火箭电泳实际是一种定量免疫电泳。其原理为:在电场作用下,抗原在含定量抗体的琼脂介质中泳动,二者比例在合适时在较短时间内形成状似火箭或锥形的沉淀线,而此沉淀线的高度常与抗原量成正比关系,因此本法可以测定样品中抗原的含量。247兽医免疫学抗
原抗体血清学实验技术免疫检测技术等四、标记抗体技术将某些物质标记在抗体分子上,通过抗原与抗体的特异性结合和标记物的敏感性检测,显示抗原抗体复合物的存在,这种技术称为抗体标记技术。根据标记物的不同,可分为酶标抗体技术荧光抗体技术同位素
标记技术248兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(一)酶标抗体技术(Enzyme-labelledantibodytechnique)是根据抗原抗体反应的特异性和酶催化反应的高敏感性而建立起来的
免疫检测技术。1、原理酶标记抗体,既不影响抗体的免疫反应性,也不改变酶的催化活性;加入酶底物后,酶可使其(供氢体)由无色的还原型转化为有色的氧化型。这种有色反应的颜色变化与样本中抗原或抗体的量成正比,且能用分光光度计进行测定。249兽医免疫学
抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2、用于标记的酶常用的有辣根过氧化物酶碱性磷酸酶酸性磷酸酶葡萄糖氧化酶半乳糖苷酶但最常用的是:辣根过氧化物酶碱性磷酸酶250兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等辣根过氧化物酶(Horseradishpe
roxidase,HRP)是从植物辣根中提取得到的一种过氧化物酶。HRP催化的底物有:(1)邻苯二胺(O-phenylenylendiamine,OPD)为橙色,最大吸收波长为490nm。适用于ELISA。(2)3,3’二氨基联苯胺(3,3‘-diaminobenzidine,DAB)适用
于免疫组化和免疫印迹。碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,AP)是从小牛肠粘膜和大肠杆菌中提取的一种酶。其催化底物为对硝基苯磷酸盐,黄色,吸收波长为400nm。251兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3、常用的酶标抗体技术
(1)酶标抗体组化技术标本制备与处理滴加酶标抗体显色反应标本观察(2)酶联免疫吸附试验(Enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)包被洗涤滴加酶标抗体底物显色酶标仪测定
252兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(二)荧光抗体标记技术(Fluoresent-labelledantibodytechnique)是应用荧光素对抗体或抗原进行标记,然后用荧光显微镜观察所标记的荧光以分析相应抗原
或抗体的一种方法。1、原理荧光素在超低浓度时可被专门的短波光源激发,在荧光显微镜下可观察到荧光。2、荧光素能产生明显荧光并作染料用的有机化学物质,称为荧光素。目前,常用的荧光素有:异硫氰酸荧光素(FITC)、四乙基罗丹明(RB200)和四甲基异硫氰酸罗丹明(TMR
ITC)。最常用的是FITC,它为一种黄色粉末,分子量为389,最大发射光谱为520~600nm,呈明亮的黄绿色荧光。253兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3、荧光抗体技术(1)标本制备:涂片、压片;冰冻切片、石蜡切片等(2)荧光抗体染色:有直接
法和间接法(3)荧光显微镜观察:光源为高压汞灯;要滴加缓冲甘油(三)放射免疫标记技术(Radioimmunoassay,RIA)1、原理放射性同位素在核衰变时,会发射雏α、β或γ射线,这些射线可用仪器探测出来。如:3H释放的射线,可用液体闪烁仪检测;32P和35
S的射线。可井型闪烁计数计检测;另外,也可通过放射自显影进行检测。254兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2、标记用的放射性同位素3H:半衰期为12.35年125I:半衰期为60.25天32P:半衰期为14.28天35S:半衰期为87.40天3、应用(1)疾
病诊断(2)微量活性物质的测定(3)药物监测255兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第二节细胞免疫学技术1、细胞免疫学技术的类型:(1)T细胞及其亚群的计数,如玫瑰花环试验等(2)T细胞活性测定,如淋巴细胞转化试验等(3)淋巴因子检测(4)
K细胞及NK细胞活性试验一、概述2、细胞免疫学技术的应用(1)测定动物的细胞免疫状态及水平(2)测定注射后动物的细胞免疫反应(3)筛选免疫增强剂或抑制剂,研究化学药物及其疗法对动物机体免疫技能的影响(4)测定淋巴因子的活性及效价水平256兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫
检测技术等二、红细胞玫瑰花环试验玫瑰花环试验,又称为花结试验。是测定淋巴细胞数量和功能的一种方法。28T细胞的E玫瑰花环试验T和B淋巴细胞表面具有不同的受体。由于T淋巴细胞表面具有与绵羊红细胞结合的受体,能与绵羊红细胞非特异性结合,形成E花环,因此,T细胞也称为红细
胞花瓣形成细胞。根据E—玫瑰花环形成率,可间接判断机体细胞免疫力。目前,已广泛应用于临床,作为测定细胞免疫状态的一个指标。257兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三、淋巴细胞转化试验正常机体T淋巴细胞在体外培养过程中受到特异性抗原或有丝分裂原刺激,可转化为淋巴母细胞。
细胞免疫缺陷时,患恶性肿瘤或某些其他疾病时,转化率显然降低。目前,最常用植物血凝素(PHA)作为分裂原来检测受试者的淋巴细胞转化率,从而判定其细胞免疫功能,称为PHA刺激淋巴细胞转化实验。258兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等方法:(1)采肝素抗凝血,37℃静置2小时
,吸取血浆层入另一无菌试管,2000rpm离心10分钟,弃上清液,用199培养液将沉淀白细胞配成1ⅹ107/mL细胞悬液。(2)取细胞悬液加入含有细胞培养液的培养瓶中。(3)按每毫升营养液加30ugPHA加入PHA。(4)37℃孵
育68—72小时,其间每天翻动1-2次。(5)振荡培养瓶,将细胞重新悬起,移入试管中。(6)1000rpm离心5分钟。(7)弃去上清取沉淀物滴于载玻片上,干燥,瑞氏染色镜检。(8)计算淋巴细胞的转化率:%化淋巴细胞数转化淋巴细胞数+未转转化淋巴细胞
数淋巴细胞转化率=100259兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第三节免疫学制备技术免疫学制备技术是免疫学检测的第一步免疫学制备技术是指制备与免疫检测有关的技术,包括抗原制备、抗体制备、抗体纯化和抗体标记等。一
、免疫血清的制备1、抗原制备2、免疫方法(1)选择健康雄兔(2)免疫注射二、抗体纯化三、抗体标记第一次(1d):脚底部注射0.5mL第二次(7d):腘淋巴结注射0.5mL第三次(14d):皮下注射1.0mL第四次(21d):静脉注射1.0mL
260兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等1.免疫学实验技术的三大类型。2.免疫血清学技术的一般特点。3.影响免疫血清学反应的因素。4.凝集反应与沉淀反应的概念。5.酶标抗体技术的原理及常用标记酶。6.荧光抗体技术的原理及常用荧光素。7.简述常见的几
种细胞免疫学技术。261兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第九章免疫学防治技术第一节免疫学诊断技术第二节免疫学预防技术第三节免疫学治疗技术262兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第一节免疫学诊断技术一、免疫诊断试剂免疫诊断是应用已知诊断试剂(抗
体或抗原),对患病动物进行抗原或抗体的测定,从而诊断疾病。诊断抗原:是利用细菌或病毒经过培养后,将菌体(病毒)灭活(或将菌体裂解)后制成。应用凝集反应的有布氏杆菌试管凝集抗原、鸡白痢沙门氏菌平板凝集抗原等;用于补
体结合反应的有鼻疽杆菌、布氏杆菌补体结合反应抗原等。用于变态反应的变应原如结核菌素、鼻疽菌素,则是用细菌培养、浓缩、裂解、抽提而制成诊断液。263兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等诊断血清:是用抗原免疫动物而制成的,
一般采用给动物多次注射抗原,然后采集免疫动物血液,分离血清,加入一定防腐剂而制成。免疫血清经过提纯后得到IgG,再用酶、荧光染料、放射性同位素标记,制成标记抗体。我国一些生物制品厂作为商品进行生产的,有辣根过氧化物酶标记的抗体,如猪瘟酶标抗体、羊抗兔酶标抗体等;用
荧光染料标记抗体,有猪瘟荧光抗体、鸡新城疫荧光抗体等;用同位素标记的抗体,有测定动物激素含量的试剂盒等。264兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二、免疫诊断试剂的应用(一)用于家畜传染病的检疫1.用血清学方法诊断疫病利用抗原抗体反应的特异性和敏感性来诊断疾病。用已知抗原诊断液,检
查患病动物血清中是否存在有相应的特异性抗体,借以诊断传染病。亦可用已知诊断血清或标记抗体,检查动物体内及排泄物中是否存在特异性抗原,用以检查病原体的存在。常用的血清学诊断方法有沉淀反应、凝集反应、补体结合反应和中和反应等。265兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等
2.用变态反应进行家畜的检疫用变应原如结核菌素,给牛点眼或皮内注射,看其是否发生炎症反应来判定其是否感染结核杆菌。用鼻疽菌素给马点眼,检查是否感染了马鼻疽杆菌。此外,还有检查布氏病的布氏杆菌水解素等。266兽医免疫学抗原抗体血清学实
验技术免疫检测技术等(二)用于病原的分型与鉴定用已知抗血清或不同型的单因子血清,对分离的病原菌进行鉴定,以确诊该病原。用单因子血清分析细菌的抗原组分,确定细菌的类型,如用沙门氏菌的单因子血清分析待检沙
门氏菌的菌体抗原及鞭毛抗原的种类,从而确定该菌属何种沙门氏菌。267兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(三)细胞免疫功能的检测动物机体对疾病的抵抗力,决定于机体的免疫状态,其免疫力强弱除了抗体外,还有细胞免疫功能。测定细胞免疫功能,能说明机体的总体免疫力,对疫病的预防及治疗具有重要的指
导意义。1.E玫瑰花环试验T淋巴细胞有绵羊红细胞的受体,将红细胞加入T细胞中,则几个红细胞结合于T细胞表面形成花环,这种花环称E玫瑰花环,可用以测定T细胞数。如人、猪T细胞可与绵羊红细胞形成花环。268兽医免疫
学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2.EA玫瑰花环试验B细胞膜上有抗体受体,鸡红细胞与抗鸡红细胞抗体结合后,能结合在B细胞表面而形成花环,可用于B细胞的测定。3.淋巴细胞转化试验T细胞在植物血凝素(PHA)作
用下,转化为淋巴母细胞,T细胞转换率高,则T细胞免疫活性强,用以测定T细胞的功能。4.抑制移动试验机体中致敏淋巴细胞受抗原刺激后,能释放抑制移动因子,使粒细胞、巨噬细胞停留在抗原作用的部位,增强对抗原作用的免疫能力。此试验可用毛细管法或琼脂糖平皿法。5.淋巴细胞毒
试验测定淋巴细胞杀伤能力,以测定机体的免疫力。269兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第二节免疫学预防技术一、概述1.生物制品:利用微生物、寄生虫或其代谢产物制成的用于预防、诊断或治疗传染病或寄生虫病的制剂。包括:疫苗、诊断试剂和免疫血清。2.动物机体获得对某种传染病免
疫力的途径天然主动免疫:自然感染病愈(免疫时间长)人工主动免疫:接种疫苗(较长)天然被动免疫:幼畜从初乳获得母源抗体(短);幼禽从卵黄获得母源抗体(短)人工被动免疫:人工注射免疫血清或高免蛋黄(短)270兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等二、疫苗的种类疫苗的概念:给动物进行人工主动免
疫的生物制品疫苗种类灭活疫苗弱毒疫苗类毒素多价苗多联苗等传统疫苗新型疫苗亚单位疫苗基因工程疫苗抗独特型抗体合成肽苗等271兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2.灭活疫苗研制:选择毒力强、免疫原性好的毒株大量培养,加0.4%左右甲醛灭活,保留免疫原
性+佐剂。特点:(1)研制时间较短,安全,可常温保存;(2)只产生体液免疫,免疫效果比弱毒疫苗差;(3)用量较大,须加入适当的佐剂。1.弱毒疫苗研制:(1)从自然界中筛选弱毒株如新城疫Ⅱ系弱毒苗;(2)将强毒株致弱后成为无致病性的弱毒株特点:(1)注射后可在动物体内短期繁殖;(2)可诱导体液免疫和
细胞免疫,刺激机体产生干扰素;(3)用量少,不需要佐剂,成本低,接种方便;(4)研制较长,需冻干冷藏保存,有毒力返强潜在危险。(一)传统疫苗272兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等3.类毒素(外毒素的灭活苗)研制:产毒细菌经液体大量培养后去除菌体,提取外毒
素,用0.4%甲醛灭活后成类毒素,加佐剂即成。应用:(1)直接作疫苗注射(2)反复注射免疫马匹,制备抗毒素血清。4.多价苗同种病原微生物的多种血清型毒株制成的疫苗,如大肠杆菌多价苗、禽流感多价苗等。5.多联苗不同种病原微生物联合制成的疫苗,如:新支二联苗(新城疫病毒+鸡传染性支气管炎毒)、
猪瘟-猪丹毒-猪肺疫三联苗、犬瘟热病毒/腺病毒/犬传染性肝炎病毒/副流感病毒/细小病毒/钩端螺旋体六联苗等。特点:一针防多种病,节约人力、物力注意:疫苗不能任意混合注射,可能互相干扰。273兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(二)新型疫苗1.亚单位疫苗提取细菌或病毒结构中的有效抗原+
佐剂,如猪大肠杆菌菌毛K88苗、禽巴氏杆菌微荚膜苗等。特点:安全,但成本高2.基因工程疫苗A.基因工程亚单位苗是用DNA重组技术,将编码病原微生物保护性抗原的基因导入受体菌(如大肠杆菌)或细胞,使其在受体细胞中高效表达,分泌保护性抗原肽链,然后提取保护性抗原肽链,加入佐剂即制成基因
工程亚单位疫苗。如预防仔猪和犊牛下痢的大肠杆菌菌毛基因工程疫苗,是一个成功的例子。274兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等B.基因工程活载体苗是用基因工程技术将保护性抗原基因(目的基因)转移到载体中,
使之表达。痘病毒、腺病毒和疱疹病毒等都可以用作载体。国外已研制出以腺病毒为载体的乙肝疫苗和以疱疹病毒为载体的新城疫疫苗等。C.基因缺失苗是用基因工程技术将强毒株毒力相关的基因切除构建的活疫苗。此种疫苗安全性好,不易返祖;其免疫接种与强毒感染
相似,机体可对病毒的多种抗原产生免疫应答;免疫力坚实,免疫期长,尤其是适于局部接种,诱导产生黏膜免疫力,因而是较理想的疫苗。目前已有多种基因缺失疫苗问世,猪伪狂犬病基因缺失疫苗已商品化并普遍使用。275兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等三、疫苗的免疫途径接种疫
苗的途径有滴鼻、点眼、刺种、注射、饮水和气雾等。应根据疫苗的类型、疫病的特点及免疫程序来选择免疫的接种途径,如灭活疫苗、类毒素和亚单位疫苗都不能经消化道接种,一般用于肌肉或皮下注射。注射时应选择活动量小、易于注射的部位,如家畜颈部皮下
、家禽胸部肌肉等。1.滴鼻与点眼免疫效果较好,仅用于接种弱毒疫苗,可直接刺激眼底哈德腺和结膜下弥散淋巴组织。另外还可刺激鼻、咽、口腔黏膜和扁桃体等,产生局部免疫。据报道,在新城疫免疫中,滴鼻和点眼产生的抗体效价比饮水接种高4倍,而且免疫期也长
。但该方法比较麻烦,费劳力,因而对大群鸡免疫很困难。276兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等2.饮水免疫是最方便的疫苗接种方法,适用于大型鸡群,但只有当疫苗接触到鼻咽部黏膜时才引起免疫反应,当其进
入腺胃时在较酸的环境中很快死亡,失去作用。饮水免疫的免疫效果较差,不适于初次免疫。3.刺种与注射也是常用的免疫方法,适用于某些弱毒苗如鸡痘与鸡马立克氏病疫苗的免疫。另外,灭活疫苗的免疫必须用注射的方法进行。刺种与注射方法免疫确实,效果好。277兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术
免疫检测技术等4.气雾免疫分喷雾(Spray)免疫和气溶胶(Aerosol)免疫两种方式。喷雾免疫的雾粒大小为10~100µm,气溶胶为<1~50µm。在新城疫免疫中,气雾免疫效果较好,不仅可诱导产生循环抗体,而且也可以产生局部免疫力。但气雾免疫会造成一定程度
的应激反应,易引起呼吸道感染。试验证明,气雾引起的应激反应程度与雾粒大小成反比,因此在有呼吸道病史的鸡场,更适于用大雾滴气雾免疫。278兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等四、确保疫苗免疫效果的措施
(一)熟悉疫苗种类和功效(二)正确选择疫苗(三)制定科学的免疫程序(四)定期抽查免疫后抗体水平(五)配合良好的饲养管理279兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(一)熟悉疫苗的种类和功效1.熟悉家畜/家禽的常用疫苗;2.每种疫苗的适
用动物品种、年龄、保存条件、保存期、接种途径、接种量、免疫期及血清型等;3.应用时注意阅读和遵照疫苗说明进行。(二)正确选择疫苗原则:1.按本地区发生或受威胁的传染病选择疫苗;2.按动物品种/年龄、传染病的流行程度/病原的血清型选择最合适疫苗.(三)制订科
学的免疫程序原则:1.一免注意幼畜(禽)母源抗体水平;2.二免、三免等注意原有抗体水平;3.结合养殖场生产实际情况;4.注意畜群健康情况280兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等目前畜禽常用的免疫程序(仅供参考):鸡:日龄
疫苗接种法剂量(头份/只)1马立克弱毒苗皮下1~2新-支二联弱毒苗滴眼、鼻15法氏囊弱毒苗饮水110新-支二联油苗皮下0.5mL15法氏囊弱毒苗饮水225新城疫Ⅰ系弱毒苗肌肉145~50新城疫Ⅰ系弱毒苗肌肉
1产蛋前新城疫+传支+法氏囊肌肉0.5~1mL10~20天+减蛋综合征四联苗产蛋中期新城疫+传支+法氏囊肌肉0.5~1mL+减蛋综合征四联苗281兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等鸭:日龄疫苗接种法剂量(头份/只)1肝炎Ⅰ
型弱毒苗肌肉13~5巴氏杆菌亚单位疫苗肌肉1里默氏杆菌+大肠杆菌油苗肌肉0.5mL25巴氏杆菌死苗肌肉1鸭瘟弱毒苗肌肉1产蛋前鸭瘟弱毒苗肌肉215~20天肝炎Ⅰ型弱毒苗肌肉2282兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等鹅:日龄疫苗接种法剂量(头份/只)25禽巴氏杆菌亚单位
疫苗肌肉2鸭瘟弱毒疫苗肌肉15产蛋前30天大肠杆菌多价死苗肌肉1.5mL产蛋前10天禽巴氏杆菌弱毒苗肌肉2鸭瘟弱毒疫苗肌肉20小鹅瘟弱毒苗肌肉2产蛋中期小鹅瘟弱毒苗肌肉4283兽医免疫学抗原抗体血清学实验
技术免疫检测技术等小猪、肉猪:日龄疫苗剂量(头份/只)30猪瘟弱毒苗245猪链球菌弱毒苗1O型口蹄疫灭活苗150猪肺疫弱毒苗1猪丹毒弱毒苗170猪瘟弱毒苗3O型口蹄疫灭活苗1284兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等种母猪、公猪:猪龄疫苗剂量(头份
/只)后备母猪、公猪猪细小病毒疫苗2配种前4周猪乙型脑炎疫苗2半年一次猪瘟弱毒苗4猪肺疫弱毒苗2猪丹毒弱毒苗2猪链球菌弱毒苗2O型口蹄疫灭活苗2(公猪)猪伪狂犬病疫苗2怀孕母猪产前4周猪伪狂犬病疫苗2285兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免
疫检测技术等兔:兔龄疫苗剂量15~20兔巴氏杆菌、波氏杆菌二联苗0.5mL/只断奶幼兔1)兔瘟灭活苗0.5mL/只2)兔巴氏杆菌、波氏杆菌二联苗0.5mL/只兔魏氏梭菌(A型)灭活苗2.0mL/只青/成兔/种兔1)兔瘟疫苗1.0mL/只
2)兔巴-波二联苗1.0mL/只怀孕母兔兔魏氏梭菌(A型)灭活苗2.0mL/只286兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等(四)定期抽查免疫后抗体水平观察或抽血送检抗体水平低或免疫失败的可能原因:1.机体方面:动物母源抗体多或原有抗体多、动物营养
不良、应激、正患病或隐性感染等2.疫苗方面:存在强毒、质量差、过期失效、漏打或接种不当、弱毒疫苗受消毒剂等杀灭等3.环境方面:畜禽密度大、空气质量低、环境卫生差、未定期消毒、死尸未及时处理导致病原体存积多等(五)配合良好的饲养管理卫生、消毒,病畜及时处理287兽医
免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等第三节免疫学治疗技术一、高免疫血清及免疫球蛋白的应用给患畜注射抗该病原的高免血清或病愈动物的血清,能起到治疗作用。如:用抗毒素治疗破伤风;用抗病毒高免血清治疗病毒病(如小鹅瘟)二、用弱毒疫苗紧急接种治疗病毒病原则:早期、大量、重复
应用和防止过敏反应288兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等1.免疫诊断试剂的种类与应用;2.生物制品的概念;3.动物机体获得免疫力的途径;4.疫苗的种类及其特点;5.疫苗的接种途径及其特点;6.确保疫苗免疫效
果的措施;7.疫苗免疫失败的可能原因。289兽医免疫学抗原抗体血清学实验技术免疫检测技术等